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实验原理免疫比浊法分类透射比浊法和散射比浊法光路(一)基本原理是个极其简单的方法。在抗原过量情况下,与待测样品中相应的Ig发生抗原-抗体反应,形成可溶性复合物,使反应介质的浊度发生改变。测量方法利用分光光度计测量被吸收的量。读数以吸收单位(A)或OD值表示,A值反映了入射光和透射光的比率。待测物中Ig含量可通过标准曲线计算得出。待测样品中的抗原含量与吸光度呈正比,而与透射光呈反比。反应在PEG的作用下,加速复合物的形成。透射比浊法测定原理样品透射比浊法的缺陷:原理散射比浊法测定原理散射光测定速率散射比浊法(一)基本原理CONCENTRATION方法评价:敏感度高快速(不必达平衡)抗原抗体结合的动态测定,理论上测定不受本底散射信号的影响可检测微量样品原理散射比浊法的缺陷影响免疫比浊测定的因素1、透射比浊操作简便,适用于普通的自动生化分析仪和普通的分光光度计,几乎所有的实验室均能开展。不足的是灵敏度和精密度均不够理想,所需的抗血清量大,检测的周期较长。2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高,检测快速。其缺点是需特定的分析仪器,试剂价格高。免疫浊度法测定中应注意的问题1、伪浊度的影响伪浊度形成原因很复杂,主要是抗血清含有非特异性的交叉反应性杂抗体成分;增浊剂浓度和反应时间掌握不当;样品本身的浊度处理不当;试剂的污染和变质;器材尤其是比色杯等不够清洁等因素。2、非特异性散射光的影响免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰,为避免这些非特异性光散射的影响,应用透射比浊法时需保证抗体组分在3%以下,散射比浊法需保证在0.5%以下。本实验中应用聚乙二醇的生理特性聚乙二醇是中性、无毒且具有独特理化性质和良好的生物相溶性的高分子聚合物,聚乙二醇即PEG具有高度的亲水性,在水溶液中有较大的水动力学体积,并且没有免疫原性。当藕联到药物分子或药物表面时,可以将其优良性质赋予修饰后的药物分子,改变它们在水溶液中的生物分配行为和溶解性,在其修饰的药物周围产生空间屏障,减少药物的酶解,避免在肾脏的代谢中很快消除,并使药物能被免疫系统的细胞识别。材料结果计算方法Thankyou!