畜禽血液样品的采集、制备与保存方法血液不断地在全身流动,参与机体的各种功能活动,对动物的新陈代谢以及维持内环境和保持与外界环境间的平衡起着重要的作用。当血液发生病理变化时,常常会影响全身的组织和器官,而组织和器官的病变又可以引起血液成分的变化,因此,血液的检验在疾病的诊断中起到十分重要的作用;临床检验采用的血液样品分为全血、血清和血浆。全血主要用于血细胞成分的检验,血清和血浆主要用于大部分临床化学检查和免疫学检验。血液样品的采集、制备与保存是重要的前期工作,是保证正确诊断的基本条件。1.采集部位与方法畜禽血液样品的采集部位和方法,与种类、检测项目、试验方法及用血量有关,视实际情况而定。1.1鸡的采血技术1.1.1翅静脉采血:是常用的采血部位,翅静脉在肘关节腹侧的表面,清晰地暴露于皮肤之下,肉眼可见。采血时先拔去该部位的羽毛,抽血时,动作轻柔缓慢,防止血管塌陷不回流,采血后略移动皮肤轻压即可止血;由于鸡的皮肤游离性大,采血后容易形成血肿。1.1.2心脏采血:此方法多用于进行尸体剖检前的血液采集检验。将鸡仰卧保定,针头从V型锁骨前端刺入,或者在靠近心脏的胸侧壁刺入;心脏采血过程中,如果操作不慎,易损伤肺脏,更有慎者,引起大出血死亡。1.2猪采血技术1.2.1前腔静脉采血:猪前腔静脉是由左右两侧的颈静脉与腋静脉至第一对肋骨间的胸骨柄汇合形成。采血时,针头刺入部位在与耳根和对侧肩胛骨上缘连线垂直线的胸骨端处,大猪采用站立保定,小猪可以采用仰卧保定法。左侧靠近膈神经,故以右侧采血为宜。1.2.2耳静脉采血:一般用于体格较大的猪。保定后,耳部消毒灭菌,以手指压迫近心端耳部静脉,使血管努张,针头刺入血管后,动作要轻柔,采血要缓慢,否则血液不回流使静脉瘪陷。1.3牛的采血技术1.3.1颈静脉采血:将头向一侧保定,用手指压迫颈静脉沟处,待血管怒张后,于采血部位消毒进针采血。1.3.2尾静脉采血:采血人员站立牛正后方,将牛尾向上抬起180度,在第一尾锥与第二尾锥之间的尾中线上进针采血。此方法需要人员少,采血速度快,可以独立操作。1.4马、羊的采血技术马、羊均采用颈静脉采血。方法同牛的颈静脉采血。1.5犬、猫的采血技术一般在后肢外侧小隐静脉或前肢内侧皮下静脉采血,采血前由助手保定,在采血部位的近心端扎止血带,待血管怒张后,迅速刺入采血器,松开止血带左手固定针头,采血力度要适当。2.血液样品的处理常规血液制备可分为抗凝血和非抗凝血,抗凝血主要用作细菌或病毒检验样品,非抗凝血一般等血液凝固后析出血清作血清学监测试验。2.1血浆的制备:在采血器内加入适量的抗凝剂,采血后,反复颠倒采血器,使抗凝剂与血液充分混匀,静臵或经过离心使血细胞下沉后,上清液即为血浆。2.2血清的制备:一般血液在室温下倾斜放臵2~4小时(防暴晒,待血液凝固后自然析出血清。或首先将采集的血液样品臵室温半小时,待血液凝固后2000~3000转/分离心5~10分钟,上清夜即为血清;如离心后有轻微的溶血,用牙签将血凝块挑出,将混有红细胞碎片的血清再次离心,用干净吸管收集血清于干燥的离心管中,贴上标签备用。如血清溶血严重,应剔出样品。2.3全血的制备:全血制备与血浆制备基本相同。供全血分析时,抗凝剂选用会直接影响化验结果。选用抗凝剂的原则:主要用于血液PH值和血液电解质测定的应选用肝素;主要用于血液促凝时间的测定应选用柠檬酸钠;主要用于血液有形成分检查的全血应选用EDTA;草酸盐不能用作血小板计数和尿素、血氨、非蛋白氮等含氮物质的检测。另外,也可将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内,振荡脱纤维蛋白。2.4血片:采取末稍血液、静脉血或心血。取一滴血液样品,滴在已消毒的载玻片上,另取一片载玻片作推片,将推片自血滴左侧向右移动,当血滴均匀地附着在两片之间后,再将推片向左平稳地推移(两片成30~45°夹角,推出均匀的血膜,涂片数张放于载玻片盒或载玻片架中。3.血液样品的保存与运送采集的血液样品如不能及时进行检验,必须做适当的处理,防止其成分发生大的变化。通常分离到的血清与血浆样品保存于密闭试管中,存放于4℃冰箱内或冷冻。全血样品应保存于4℃冰箱内,检验时,样品必须达到室温,达到室温之后颠倒数次,使血液充分混匀后,方可检验。如果样品能在24小时内送往实验室,可保存于4℃环境的保温箱内,如果24小时内不能抵达或有些样品送往外地实验室时,样品必须冷冻处理后,并在低温下运送。运送途中防止样品泄漏,密闭封装并加冰袋运送。同时要填写详细的样品记录。4.分析:血液样品变异因素的控制严格控制血