人体组织学与解剖学实验石蜡切片的制作材料和用具大白鼠。95％及无水乙醇、固定剂、蛋白甘油、染色液、盐酸乙醇、二甲苯、切片石蜡、中性树胶、氨水。解剖器一套、单面刀片、切片刀、切片机、载玻片、盖玻片、标本瓶、烧杯、量筒、漏斗、染色缸、树胶瓶、乙醇灯、毛笔、绘图纸、滤纸、标签纸、熔蜡箱(或恒温箱)、展片台(或烫板)、小木块、蜡带盒、烤片盒、切片托盘、显微镜。试剂的配制(一)70％、80％、90％乙醇95％以下的各级浓度乙醇是用95％乙醇加蒸馏水稀释而成。简单的稀释方法是：所需稀释的浓度是多少，就量取多少毫升95％的乙醇，再加蒸馏水至95ml即可例如，配制70％乙醇，就量取70m195％的乙醇，然后加入蒸馏水至95ml即成。(二)固定剂常用的固定剂有4％甲醛溶液、Bouin液和Zenker液等。Bouin液在组织学制片技术中应用甚广，其配方如下：苦味酸饱和水溶液75ml4％甲醛溶液25ml冰醋酸5ml(三)染色液以HE染色为例，需配制苏木精染液和伊红染液。1．苏木精染液苏木精是一种碱性染料，它可将核染色质染成蓝紫色。配方有多种，现介绍Harris苏木精的配制：甲液：苏木精0.5g95％乙醇5ml乙液：硫酸铝钾(或硫酸铝铵)10g蒸馏水100ml氧化汞0.25g冰醋酸几滴先将甲液溶解，再将乙液的硫酸铝钾溶于蒸馏水中，并加热使溶解，然后将甲、乙两液混合煮沸，离开火焰后缓缓加入氧化汞。冷却后过滤，加入几滴冰醋酸即成。2．曙红染液曙红是一种酸性染料，它可使多种细胞的胞质染成粉红色或红色。0．5g曙红溶于100m195%乙醇中即配成曙红染液。(四)蛋白甘油蛋白甘油是粘贴蜡片用的黏片剂。配法如下：取一新鲜鸡蛋的蛋清，充分搅拌成雪花状泡沫，然后滤去泡沫，加入等量甘油，搅拌均匀，再加入一小粒麝香草酚防腐。(五)盐酸酒精盐酸酒精用于分色。配制方法是在100m170％乙醇中加入lml盐酸。制作石蜡切片的一般步骤：（一)取材采集材料应根据制片的目的和要求而定，材料要有代表性，无病虫害或其它损伤，如要观察病理解剖，则要取病斑、病症部位。为使固定液能迅速的渗透材料，新鲜材料要进行分割。分割时动作要迅速，以防材料萎蔫。分割块的大小，宜小不宜大，一般不超过1cm3，分割后立即固定。取材（二）固定和冲洗利用药剂迅速把细胞杀死，以保持材料本来的状态和结构。将固定液放在密封较好的小瓶中，投入材料，盖好瓶盖。用Bouin液固定的材料，可直接移人70％乙醇中，多换几次乙醇进行冲洗，直至材料无黄色时为止。也可在乙醇中加入几滴氨水或饱和碳酸锂水溶液，以迅速洗去黄色。冲洗后的材料若暂时不制片，可保存在70％乙醇中。然后保存在70%的酒精中备用。（三）脱水脱水的目的是除去组织中的水分，便于透明、浸蜡、包埋等步骤的进行，因为这些程序中所用的药品都不能与水混合，所以必须脱水。常用的脱水剂为酒精。脱水采用等级脱水（梯度脱水），即从较低浓度酒精开始，逐渐替换到高浓度酒精。一般为：50%→70%→80%→95%→无水酒精（两次），每级停留时间2~4小时或更长（无水酒精中时间宜短）。脱水应彻底，否则材料不能透明，将影响石蜡的渗入，致使难以切片。（四）透明透明的目的是将脱水剂从材料中除去，使材料透明，增记折光系数；同时便于下步的浸蜡和包埋等程序。常用的透明剂为二甲苯，适用原则也是逐级进行，可减少材料收缩。一般步骤是：次经1：1无水乙醇与二甲苯、二甲苯(Ⅰ)和二甲苯(Ⅱ)，在各级溶液中历时0．5～2h，最终使组织达到透明为止。二甲苯穿透能力强，但又宜使材料收缩变脆，使用时不能在其中停留时间过长。（五）浸蜡浸蜡的目的是去除组织中的透明剂，而使石蜡渗入整个组织，组织获得一定的硬度，以便切成薄的切片。先将装有25%石蜡二甲苯混合液、50%石蜡二甲苯混合液、75%石蜡二甲苯混合液、纯蜡(Ⅰ)、纯蜡(Ⅱ)和纯蜡(Ⅲ)的六个烧杯，放在包埋箱内使石蜡熔化，包埋箱的温度要保持恒定(约55℃左右)，切勿太高或过低。然后将透明了的材料依次放入六杯蜡中。浸蜡时间视材料大小而定，一般总的浸蜡时间为2～4h左右。浸蜡（六）包埋将浸蜡后的材料包埋于石蜡中，并使之凝固成蜡块，这一过程称为包埋。包埋前，视组织块的大小先用绘图纸折成一纸盒，作为包埋的模具。纸盒折法如下：包埋块（七）修块将已包埋好的蜡块切成小块，每一小块包含一块材料。然后按照所需的切面，用单面刀片将小蜡块切成梯形，并可粗视到材料切面。然后用烧红的蜡铲把蜡块底部牢固的粘接在木制托柄上。（八）切片用切片机（如旋转切片机）将蜡块切成连续的蜡带。切片时先把切片刀夹在刀架上，再把木质