STAT6基因克隆及对成纤维细胞增殖的影响的任务书.docx
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STAT6基因克隆及对成纤维细胞增殖的影响的任务书任务目的:1.克隆STAT6基因,并进行表达载体构建;2.检测表达载体及其表达的STAT6基因对成纤维细胞增殖的影响。任务内容:1.从人体组织中提取RNA,进行cDNA合成和PCR扩增STAT6基因序列;2.将扩增的STAT6基因序列插入到表达载体中,构建出表达STAT6基因的载体;3.使用脂质体介导的转染方法将表达载体转染到成纤维细胞中;4.使用MTT法、克隆形成实验等方法,评价表达载体及其表达的STAT6基因对成纤维细胞增殖的影响;5.使用Westernblotting技术检测表达载体及其表达的STAT6基因的蛋白表达。任务周期:本任务周期为1-2个月,按以下任务进度安排:第1周:RNA提取、cDNA合成和PCR扩增STAT6基因序列;第2周:表达载体构建;第3周:成纤维细胞培养、脂质体介导的转染;第4周:MTT法测定细胞增殖;第5周:克隆形成实验;第6周:Westernblotting技术检测蛋白表达。任务成果:1.成功克隆了STAT6基因,并构建出表达载体;2.明确了表达载体及其表达的STAT6基因对成纤维细胞增殖的影响;3.填写相关实验记录和分析报告,并进行实验结果的总结和讨论。