北京棒杆菌邻氨基苯甲酸合成酶基因的克隆、序列分析及表达的中期报告.docx
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北京棒杆菌邻氨基苯甲酸合成酶基因的克隆、序列分析及表达的中期报告本研究旨在克隆北京棒杆菌邻氨基苯甲酸合成酶(PABAsynthase)基因,分析其序列信息,并进行表达研究。首先,通过PCR扩增方法从北京棒杆菌基因组中扩增出了PABAsynthase基因片段,约为900bp。利用T-A克隆方法将其插入载体pMD19-T中进行测序验证。通过测序分析发现,该PABAsynthase基因片段编码了298个氨基酸,分子量约为33kDa。与GenBank数据库中的已知序列进行比对,发现其与其他棒杆菌属物种的PABAsynthase基因具有高度同源性,并显示出明显的保守区域。为了进一步研究该基因的功能,我们在大肠杆菌中表达了该基因,并通过SDS-PAGE和Westernblot等方法进行了检测和鉴定。结果表明,表达的PABAsynthase蛋白具有较高的纯度和特异性,为后续研究提供了保证。综上所述,本研究初步成功克隆了北京棒杆菌PABAsynthase基因,分析了其序列信息,并在大肠杆菌中进行了表达研究,为深入探究该基因的生物学功能奠定了基础。
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