BRCA基因的克隆,表达与纯化的中期报告.docx
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BRCA基因的克隆,表达与纯化的中期报告本实验是关于BRCA基因的克隆、表达与纯化的中期报告,以下是实验进展情况:1.BRCA基因克隆首先,我们从NCBI上下载了BRCA1和BRCA2基因的序列信息,设计了针对两个基因全长的引物。随后,我们从正常人DNA样本中扩增出了BRCA1和BRCA2基因的全长序列,并经过测序进行了验证和比对。2.BRCA基因表达接下来,我们将BRCA1和BRCA2序列分别克隆至表达载体中,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。通过对感光性的筛选,最终得到了明显的重组菌落。此后,我们进行了菌落PCR验证,并对PCR产物进行了比对和测序。3.BRCA基因纯化在表达验证成功后,我们对BRCA1和BRCA2的蛋白表达进行了纯化。具体来说,我们在大肠杆菌中表达了His-tagged的BRCA1和BRCA2,并利用亲和层析法对其进行了纯化。在表达和纯化后,我们进行了SDS-PAGE和Westernblot分析,并对蛋白含量进行了定量和比较。总的来说,通过这一中期报告,我们的BRCA基因克隆、表达与纯化实验已经得到了初步的成功结果,并将继续完善实验设计和操作,以进一步提高实验效果和结果。