RNA干扰技术在病毒防治中的应用RNA干扰（RNAinterference,RNAi）即将特定基因某一片段的正义和反义序列所形成的双链RNA(dsRNA)导入细胞后，可使该基因的mRNA降解，从而导致该基因转录后沉默(posttranscriptionalgenesilencing，PTGS）RNAi是生物体对病毒基因等外源核酸侵入的一种保护性反应。它普遍存在于各种生物中，具有抗病毒、稳定转座子及监控异常表达mRNA等生物学功能。RNAi作用原理首先，dsRNA被RNAseII家族的酶切割成具有21~23nt的由正义和反义序列组成的siRNA(SmallinterferingRNA)，siRNA与一些酶和相关因子共同组成RNA介导的沉默复合体(RISC)，RISC在ATP的作用下，由解旋酶解开siRNA的双链，使RISC转变成活性复合体(siRNA的双链解旋后形成的一种稳定的活性结构形式)；其次，siRNA的反义链引导复合体与靶mRNA的特异序列杂交，由RdRp(RNAdirectionRNAployase)催化，以siRNA的反义链为引物、靶mRNA为模板，合成新的长链dsRNA，新合成的长链dsRNA被Dicer等内切酶切割成21~23ntsiRNA。最后，新生成的siRNA和有活性的RISC又进入以上循环。新生的dsRNA反复合成和降解，不断产生新的siR—NA，而使靶mRNA渐进性地减少，表现出基因沉默现象。同时，结合了RISC的靶mRNA也会被内切酶切割，mRNA链上缺乏poly(A)尾巴和稳定头部的保护，而被快速降解。RNAi在抗病毒中的应用在利用RNAi技术进行基因治疗研究中发现，选择病毒基因组中与人类基因组无同源性的序列作为抑制序列可在抑制病毒复制的同时避免对正常组织的毒副作用。同时将抑制序列选择在特定的位点，可对部分有明确基因突变的恶性肿瘤细胞产生凋亡诱导作用。RNAi的应用主要是将病毒基因片段转入寄主使寄主具有抗病毒性状。Waterhouse等(1998)发现可利用同时接种或转入正向与反向的二条RNA分子，或一条可自行折回形成双股RNA的分子诱导出植物对于马铃薯Y病毒(PotatovirusY，PVY)的抗病毒性状。在动物及人类病毒疾病方面，RNAi技术亦被广泛研究，并在几种病毒疾病上已有较具体之初步成果，包括口蹄疫病毒(FootandMouthDiseaseVirus，FMDV)、C型、B型、G型肝炎病毒、甚至造成(AIDS)的HIV病毒等，其中应用RNAi技术来对抗HIV病毒的研究更被寄予厚望。AlnylamPharmaceuticals公司针对流感病毒复制必需的基因，进行了流感的RNAi治疗药研究，制作出来的siRNA显示出对多种流感病毒株包括H5N1在内具有高效的抗病毒活性，为流感的治疗开辟了新的途径。随着研究的深入，RNAi逐渐用于登革热病毒、脊髓灰质炎病毒、流感病毒等引起的病毒性疾病的治疗，并有望成为抗病毒感染基因治疗的一种新方法。----波波，2010年