核苷酸与核酸.ppt
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分子生物学是研究核酸和蛋白质的结构与功能的学科。在分子水平上阐述基因的结构、基因的复制、基因的表达和调节、蛋白质与核酸的相互作用、蛋白质与蛋白质的相互作用。医学分子生物学是分子生物学的一个重要分支,是从分子水平研究人体在正常和疾病状态下生命活动及其规律的一门科学。医学分子生物学主要研究人体生物大分子和大分子体系的结构、功能、相互作用及其与疾病发生、发展的关系。生物化学与分子生物学(供8年制及7年制临床医学等专业用)贾弘缇,冯作化主编人民卫生出版社(第二版2010)2.医学分子生物学(供研究生用)(全国高等医药院校教材)查锡良主编人民卫生出版社主要内容核酸结构与功能蛋白质的结构与功能遗传信息传递的整体性(基因组学、转录组学、蛋白组学及“组学”在医学中的应用)基因表达与调控(原核生物基因表达调控,真核生物基因表达调控)DNA操作基本技术(分子杂交,PCR,DNA测序等)DNA重组技术基因诊断与基因治疗核酸(nucleicacid):是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子,携带和传递遗传信息。核酸的分类及分布History核酸的化学组成(TheChemicalComponentofNucleicAcid)核酸的化学组成核酸的基本组成单位是核苷酸(nucleotides)嘌呤嘌呤(purine)嘧啶(pyrimidine)稀有碱基(rarebases)核苷(nucleoside)碱基与戊糖通过β-N-糖苷键共价相连而形成的一种糖苷。核苷酸:AMP,GMP,UMP,CMP脱氧核苷酸:dAMP,dGMP,dTMP,dCMP核苷酸(nucleotide)多磷酸核苷酸:NMP,NDP,NTP核苷酸的功能核酸的结构StructureofNucleicAcid一、核酸的一级结构(primarystructure)5´端书写方法碱基戊糖磷酸DNA的结构一、DNA的一级结构二、DNA的二级结构(Secondarystructure)---双螺旋结构(DoublehelixofDNA)DNA双螺旋结构模型要点3.两条链通过碱基间的氢键相连,A对T有两个氢键,C对G有三个氢键,这种A-T、C-G配对的规律,称为碱基互补规则。4.维持双螺旋稳定的因素:横向为氢键,纵向为碱基间的堆积力。DNA双螺旋结构的多样性三、DNA的高级结构原核生物(Prokaryotic)DNA的高级结构超螺旋结构(superhelix或supercoil)DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。EMimageofsupercoiledDNA意义DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。DNA在真核生物(Eukaryotic)细胞核内的组装(约60bp)串珠状核小体结构真核生物染色体DNA组装DNA的功能(FunctionsofDNA)基因组(Genome)包含了所有编码RNA和蛋白质的序列及所有的非编码序列。人的基因组有2×109个碱基对。DNA的结构特点具有高度的复杂性和稳定性,满足遗传多样性和稳定性。2.DNA可以发生重组和突变,为自然选择提供机会。RNA的结构与功能RNA常以单链形式存在,局部也可形成二级结构和三级结构。RNA分子比DNA分子小得多,数十个至数千个核苷酸组成。RNA种类、大小和结构多样化。RNA和蛋白质共同负责基因的表达和表达调控。主要RNA的种类、分布及功能一、信使RNA(MessengerRNA,mRNA)-------作为蛋白质合成的模板*mRNA结构特点mRNA核内向胞质的转位mRNA的稳定性维系翻译起始的调控tRNA的一级结构特点含稀有碱基较多3´末端为-CCA-OH*tRNA的二级结构——三叶草形*rRNA的结构核糖体(ribosomes)的组成18SrRNA的二级结构四、其他小分子RNA及RNA组学snmRNAs的种类核内小RNA(snRNA)核仁小RNA(snoRNA)胞质小RNA(scRNA)催化性小RNA小片段干扰RNA(siRNA)核酸的理化性质ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid一、核酸的一般理化性质腺嘌呤1.DNA或RNA的定量OD260=1.0相当于50g/ml双链DNA40g/ml单链DNA(或RNA)20g/ml寡核苷酸2.判断核酸样品的纯度DNA纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品:OD260/OD280=2.0二、DNA的变性(denaturation)DNA的紫外吸收光谱*解链曲线(MeltingcurveofdsDNA)在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作