油茶果皮多元酚富集工艺研究.docx
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油茶果皮多元酚富集工艺研究【摘要】目的建立油茶果皮中多元酚的富集工艺。方法油茶果皮用60%丙酮-水提取,醋酸乙酯萃取后,流经D101型大孔吸附树脂,然后用不同浓度乙醇梯度洗脱,最后紫外分光光度法测定多元酚含量。结果60%丙酮-水提取物中多元酚含量为%,萃取后含量达到%,用30%乙醇进行洗脱,此组分含量可达45%。结论此工艺用于油茶果皮中多元酚的富集操作简单、效果好。【关键词】油茶果皮多元酚大孔树脂富集工艺Abstract:ObjectiveToestablishaprocessingmethodforenrichingpolyphenolfromCamelliaoleiferaAbelpeelbyMacroporousResinthatpeelofCamelliaoleiferaAbelwasextractedby60%Acetone-H2Oandfractedbyethylacethe.Gradientalcoholelutionwasusedtoelutethecomponentsabsorptedonmacroporousresinandtheircontentsweredeterminedbyspectrophotometry.ResultsTheextractionof60%Acetone-H2Owasverygoodandthepolyphenolwasgatheredin40%alcohol.Thecontentofpolyphenolwas45%.ConclusionTheprocessingtechnologycanbeusedtoenrichpolyphenolfromCamelliaoleiferaAbelpeel.Keywords:CamelliaoleiferaAbelpeel;Polyphenol;Macroporousresin;Process油茶果皮是油茶果实去籽后的干燥果壳。油茶CamelliaoleiferaAbel为山茶科山茶亚属油茶组植物,在我国资源丰富。油茶根皮、花、种子、油粕早就被《中国药典》收载为药用[1],而茶油在2005年版《中国药典》才收载入药[2]。现代研究证明,油粕和油茶果皮均具有抑制肿瘤细胞生长的药理作用。到目前为止,对油茶根皮、花、种子、油粕的研究均有报道[3],而对油茶果皮的研究却少之又少。前期研究得知油茶果皮含有大量的鞣质和皂苷类成分。为明确油茶果皮抗肿瘤作用的具体药用部位,本文对采自广西巴马县的油茶果皮中多元酚类成分进行了富集工艺研究,为进一步确证油茶果皮的抗肿瘤作用和开发应用提供理论依据。1仪器与试药Unico7200可见分光光度计;Laborata4000型旋转蒸发仪;BP210s十万分之一电子天平;Jascov-560紫外可见分光光度计;没食子酸;所用试剂均为分析纯;水为蒸馏水;油茶果皮。2方法与结果样品提取称取油茶果皮250g,60%丙酮-水回流提取3次,1h/次[4],合并提取液,回收溶剂至干,供用。总多元酚含量测定标准品与样品溶液的制备精密称取10mg干燥至恒重的没食子酸,置于100ml容量瓶中,用水溶解,精确配制mg/ml没食子酸标准品溶液,备用。取60%丙酮-水提取浸膏7g,置于100ml容量瓶中,加入水溶解至刻度,摇匀过滤,弃去初滤液20ml左右。精确吸取续滤液5ml置于50ml棕色容量瓶,加水稀释至刻度,得样品溶液浓度为7mg/ml。测定波长的选择标准品与样品加磷钼钨酸-碳酸钠显色剂[5],30min后用分光光度计在400~800nm范围内,对标准品和样品进行波长扫描,结果在754nm左右有最大吸收,故以没食子酸最大吸收为基准,选择754nm作为测定波长。标准曲线的绘制精密吸取没食子酸标准溶液,,,,ml,分别置于10ml棕色容量瓶中,加水至5ml,再分别加入1ml磷钼钨酸,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀。以相同试剂为空白,30min后在754nm处测定其吸光度。以A值为纵坐标,体积V(ml)为横坐标,得回归方程:A=5V+9(r=8),线性关系良好,其线性范围为5~5mg/ml。样品多元酚含量测定精密吸取样品溶液ml,置于10ml棕色容量瓶,依照标准曲线绘制项下的方法测定吸光度,并计算多元酚含量,浸膏中总多酚的含量为%,RSD=%。萃取工艺研究取干燥浸膏10g直接加醋酸乙酯萃取,可稍微加热,然后减压下回收醋酸乙酯,得到萃取样品g,采用上述方法测定萃取物中多元酚含量,结果为%,收率为18%。大孔吸附树脂富集工艺研究大孔吸附树脂的处理将大孔树脂装入吸附柱中,并保持95%乙醇液面高出树脂,浸泡。之后95%乙醇洗涤树脂层,至流出液加蒸馏水不呈白色浑浊,再用蒸馏水洗至无醇味即可。然后用4%NaOH溶液1-2体积动态洗涤-水洗至中性-4%HCl1