肉毒毒素介绍主要内容肉毒毒素介绍?历史发展?结构?作用机理?药理毒理免疫原性目前商用的肉毒素及保妥适的特点保妥适?配制注意事项什么是肉毒毒素?(肉毒神经毒素,肉毒杆菌神经毒素，肉毒梭菌毒素)是肉毒梭菌(Clostridiumbotulinum)在生长繁殖过程中产生的一种细菌外毒素?一种厌氧菌，其孢子常规在土壤中，与产生破伤风毒素的细菌属同一科?在合适的条件下（10oC，无氧，合适的酸度）孢子生长为梭菌?细菌继续产生大量的孢子或自溶将毒素释放出来?不同的菌株(如Hall株,Bean株)产生不同亚型的神经毒素(分为A、B、C、D、E、F、G等7个抗原型),其中A型毒力最强?是导致肉毒中毒(Botulism)的原因生物制品的特定没有仿制品的概念?肉毒毒素是一类产品名，而非通用名?与疫苗接近产品本身没有专利，生产工艺专利用单位（Unit）衡量，单位之间不能换算很容易得到，很难提纯，很难恒定FDA最新通告：历史和发展（1）?首次沉淀纯化A型肉毒毒素（H.Sommer)?Lammanna首次分离出A型肉毒素结晶JustinusKerner推测“腊肠毒”作用原理，并提出应用于治疗的可能性19441920s189519461820?EVanErmengem分离肉毒梭状芽胞杆菌?Schantz开始研究其特性和应用历史和发展（2）VBrook证实A型肉毒毒素阻断乙酰胆碱释放Schantz和Scott继续研究Scott获得FDA批准在人身上进行试验（眼睑痉挛，半面肌痉挛）198419781960’s–1970’sMFBrint用于治疗眼睑痉挛，半面肌痉挛斜颈，喉部肌张力障碍，书写痉挛等…1950’s1950’s–1960’s纯化过程优化(DuffandSchantz)Scott在猴子身上进行A型肉毒毒素治疗斜视的试验历史和发展（3）Allergan获得FDA批准以BOTOX商品名上市；用于治疗眼睑痉挛，斜视和第VII神经功能紊乱83个国家22个适应症1998年6月中国药品监督管理局批准保妥适?用于治疗眼睑痉挛、面肌痉挛及相关病灶肌张力障碍。2006年6月GSK在中国上市保妥适?200920061997198919982002Allergan公司获得对A型肉毒素的所用权FDA批准低蛋白剂型每100单位5ngFDA批准美容适应症2月11日获中国SFDA批准用于皱眉纹不是个合适的生化武器温度、湿度，空气和光照都会使毒素降解雾状的毒素，很不稳定常规的消毒方法既能使其灭活?氯，加热85?C5分钟人与人不能传播存在肉毒素抗毒素（但对已经存在的症状无效）高纯度的保妥适?治疗不会导致肉毒中毒肉毒中毒:?肉毒毒素导致的一种全身性的反应致死剂量(70kg人)静脉注射3,000单位保妥适是高度纯化的肉毒素?局部注射治疗,直接注射在相关肌肉或腺体上?如剂量合适,很少弥散到其它肌肉每瓶保妥适?只含100单位纯化的肉毒素?治疗剂量与中毒剂量相差很远?皱眉纹标准剂量：20U每瓶保妥适含蛋白5ng1ng=10-9g要导致死亡,需静脉注射30瓶以上保妥适?保妥适?是局部用药在治疗剂量内，血液中检测不到肉毒素邻近肌肉全身作用靶肌肉弥散BOTOX?效应剂量本研究的临床相关性有待明确Aoki,Neurology2003;60(5Suppl1):A212-A213ABS-P03.088肉毒素结构50KD150KDCOOHNH2S-S100KDHeavyChain重链SS与靶位受体结合，促轻链内转LC轻链以锌肽链内切酶实施毒效NH2血凝素维持毒素三维结构稳定前体毒素－900KD复合体HA(Haemagglutinin),血凝素NTNHnon-toxicnonhaemagglutinins非血凝素蛋白影响结构因素：热变性，碱性条件空气/液体介面形成的气泡改变毒素形态，氮气/二氧化碳稀释至过低浓度COOH作用机理(1)神经肌肉接头神经末梢突触囊泡SNARE蛋白形成复合体正常神经递质释放过程肌肉细胞突触囊泡蛋白SNARE蛋白突触相关蛋白突触融合蛋白囊泡和终板膜融合突触融合复合体神经终点突触间隙乙酰胆碱乙酰胆碱受体神经递质释放肌肉细胞肌肉纤维收缩作用机理(2)当有神经肉毒素时轻链水解特异SNARE蛋白B,D,F,G型轻链重链A,C,E型C型膜没有融合SNARE复合体不能形成肉毒素以胞饮方式进入肉毒素神经递质不能释放肌肉细胞肌肉纤维瘫痪尚有其它作用机理–如疼痛作用机理