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本章主要内容核苷酸DNARNA核酸性质认识核酸在生命科学上主要性搞清碱基、核苷、核苷酸和核酸分子结构上关系掌握核酸化学本质及DNA和RNA在组分、结构和功效上差异认识核酸结构与其性质与功效之间关系。1869年F.Miescher首先从伤员绷带脓细胞中分离得到称为“核素”核酸1944年O.N.Avery经过转化试验证实DNA是主要遗传物质1953年J.D.Watson和F.H.C.Crick提出DNA双螺旋结构模型1958年Crick提出遗传信息传递中心法则1970年,建立DNA重组技术1980年后,分子生物学、分子遗传学等学科突飞猛进发展,提出并完成HGP.一、概述概念“四核苷酸假说”:核酸由四种核苷酸组成单体组成,缺乏结构方面多样性,不大可能有主要生理功效。1944年,Avery等人肺炎双球菌转化试验证实核酸是生命遗传基础物质。1952年,Hershey和ChaseT2噬菌体侵染试验彻底证实遗传物质是核酸,而不是蛋白质。1928年,英国S型肺炎球菌:有荚膜,菌落表面光滑R型肺炎球菌:没有荚膜,菌落表面粗糙结果说明:加热杀死S型肺炎球菌中一定有某种特殊生物分子或遗传物质,能够使无害R型肺炎球菌转化为有害S型肺炎球菌这种生物分子或遗传物质是什么呢?分布:二、核酸组成成份核苷酸基本结构(一)核酸中戊糖从两类核酸水解产物可看到它们组成差异?(二)碱基N2、嘌呤碱(purine):由嘌呤衍生而来。N3、稀有碱基:(三)核苷:(nucleoside)O核苷表示:脱氧核糖核酸和核糖核酸异同对比(四)核苷酸(nucleotide,nt)2、结构:3、表示:4、特殊核苷酸:核苷酸衍生物核苷酸衍生物(五)核苷酸连接方式2、核酸一级结构:2)读向:三、DNA(二)DNA双螺旋二级结构双螺旋中碱基对(basepair,bp)2.双螺旋结构特点:(Watson-Crick模型)2)结构:3)尺寸:4)双螺旋稳定性:3、二级结构构象类型:B-DNA与A-DNA几个DNA钠盐特点:(三)DNA三级结构1、超螺旋结构回文结构中单链可形成发夹结构双链回文结构可形成十字架结构DNA其它结构2、核小体中扭曲方式真核生物:DNA和蛋白质组装成染色体,染色体基本单位是核小体。1、DNA是遗传信息载体2、DNA是变异物质基础四、RNA(二)RNA类型三种RNA功效1、tRNA1)tRNA结构:主要特征:1.四臂四环;2.氨基酸臂3′端有CCAOH共有结构;3.D环上有二氢尿嘧啶(D);4.反密码环上反密码子与mRNA相互作用;5.可变环上核苷酸数目能够变动;6.TψC环含有T和ψ;7.含有修饰碱基和不变核苷酸。tRNA三级结构为倒L型A、在pr合成中转运aa;B、在pr合成起始、DNA反转录合成及其它代谢调整中起作用。2、mRNA和hnRNA合成mRNA切除内含子2)mRNA结构特点:3)功效:是蛋白质合成模板3、rRNA核糖体RNA自我剪切4、RNA功效五、核酸性质核酸溶解性质0.14摩尔法:分离DNA蛋白(DNP)和RNA(RNP)蛋白(RNP)方法DNA蛋白:在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最低.RNA蛋白:在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度较大.核酸分子中磷酸二酯键可在酸、碱性和酶条件下水解切断,结果是多核苷酸链被打断,核酸被降解.酸解酸能够使DNA和RNA降解,酸对核酸作用因酸浓度、温度和作用时间不一样而不一样。碱解酶水解DNA限制性内切酶细菌碱基修饰:参加DNA修复及RNA合成后剪接等主要基因复制和基因表示过程负责去除多出、结构和功效异常核酸,同时也能够去除侵入细胞外源性核酸在消化液中降解食物中核酸以利吸收体外重组DNA技术中主要工具酶颜色反应:1、一个单链DNA和一个单链RNA分子量相同,试述能够用几个方法将它们区分开?2.转食品基因安全吗?转基因有两派反对派:反对派道理在于转基因抗病抗虫功效来自于毒蛋白基因,虫吃了是要死,人吃了怎么办?赞成派:昆虫死亡是因为气孔闭塞了,但这跟人消化道完全是两码事。”中间派:(二)紫外吸收性质2、确定所提取核酸是否纯品。1)DNA:OD260/OD280≈1.8纯品2)RNA:OD260/OD280≈2.0纯品在纯化DNA时,通惯用A260/A280=1.8-2.0作为纯度标准,若大于此值,表示有RNA污染;若小于此值,则有pro或酚污染.(三)核酸结构稳定性(四)核酸变性2)结果:A、增色效应:260nm紫外吸收增加;B、粘度下降;C、生物学性能部分或全部丧失。3)引发变性原因:温度、pH、尿素、甲醛等。增色效应2、热变性与Tm3、影响Tm原因:(五)核酸复性DNA变性与复性减色效应六