沙湾一中生物组主备人：袁慧敏周秋燕选修一《生物技术实践》讲学稿沙湾一中生物组主备人：袁慧敏周秋燕选修一《生物技术实践》讲学稿课题3酵母细胞的固定化[基础知识回顾]一:基础知识（一）课题背景酶：优点：催化效率，低耗能、低污染,广泛应用各个领域。问题：对环境条件，易失活；很难，不能再次利用,提高了生产成本;反应后混合在产物中,如不除去,会影响产品质量。设想：将酶固定在的载体上。固定化酶：优点：既能，也能，同时还可以被利用。问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中,很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的设想：将合成酶的直接固定。固定化细胞：优点：成本更，操作更固定化酶的应用实例1．高果糖浆的生产需要使用，它能将葡萄糖转化成。这种酶的好，可以持续发挥作用。但是，酶溶解于葡萄糖溶液后，就无法从糖浆中回收，造成很大的浪费。2．使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的。酶颗粒通过筛板上的小孔，而反应溶液却可以。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与接触，转化成果糖，从反应柱的流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。（三）固定化细胞技术1．概念：固定化酶和固定化细胞是利用或方法将酶或细胞固定在一定空间的技术。2．方法：、和法。3．酶和细胞的固定方法和特点固定对象酶细胞适宜固定法特点体积小，固定一种酶。包埋法容易丢失体积大，固定一系列酶。难以化学结合和吸附4.固定细胞的材料：固定细胞时应当选用载体材料，如明胶、琼脂糖、、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等二:实验设计（一）制备固定化酵母细胞及发酵流程：1.酵母细胞的：由状态恢复为。2.配制物质的量浓度为0.05mol/L的溶液。3.配制海藻酸钠溶液：海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要通过加热促使其溶解。加热时最好采用________________________方法。（注意浓度适宜，保证凝胶珠成型且能固定）。4.海藻酸钠溶液与充分混合：海藻酸钠溶液需，防止过热杀死酵母细胞。5.固定化酵母细胞。（二）用固定化酵母发酵1.将固定好的酵母细胞（凝胶珠）用冲洗2～3次。2.将凝胶珠加入用于发酵的葡萄糖溶液后会发现有产生，同时有味散发。三:结果分析与评价观察凝胶珠的颜色和形状合格的凝胶珠是淡黄色，形状是圆形或椭圆形；如果制作的凝胶珠，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。【达标检测】1.使用固定化细胞的优点是()A.能催化大分子物质的水解B．可催化一系列化学反应C．与反应物易接近D．有利于酶在细胞外发挥作用2.酶的固定方法不包括()A.将酶吸附在固体表面上B．将酶相互连接起来C．将酶包埋在细微网格里D．将酶制成固体酶制剂，如加酶洗衣粉中的酶3.如果反应物是大分子物质，采用那种方法催化受限制()。A．直接使用酶B．使用化学方法结合的酶C．使用固定化细胞D．使用物理吸附法固定的酶4.下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是()。A．酶分子很小，易采用包埋法B．酶分子很小，易采用化学结合或物理吸附法固定的酶C．细胞个大，难被吸附或结合D．细胞易采用包埋法固定5.关于固定化酶的叙述不正确的是()。A．既能与反应物接触，又能与反应物分离B．固定在载体上的酶可被反复利用C．可催化一系列反应D．酶的活性和稳定性受到限制6．下列关于固定化酶技术的说法正确的是（）A．固定化酶技术就是固定反应物，将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B．固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C．固定化酶中的酶无法重复利用D．固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术7.关于酵母细胞活化的说法，不正确的是()。A．酵母细胞活化就是由无氧呼吸变成有氧呼吸C．酵母细胞活化所需要的时间较短B．活化就是让处于休眠状态的细胞恢复生活状态D．酵母细胞活化后体积增大8．目前，日用化工厂大量生产的酶制剂，其中的酶大都来自（）A．化学合成B动物体内C植物体内D微生物体内9．下列制备固定化酵母细胞的正确步骤是()①配制CaCl2溶液②配制海藻酸钠溶液③海藻酸钠溶液与酵母细胞混合④酵母细胞活化⑤固定化酵母细胞A.①②③④⑤B.④①③②⑤C.④⑤②①③D.④①②③⑤10.下列属于固定化酶应用特点的是()。①可以被反复利用②有利于酶与产物分离③能自由出入载体④一种固定化酶只催化一种酶促反应⑤酶多用包埋法固定化A．①②③B．③⑤C．①②④D．①②⑤【课后反思】----------------------------