AD载体介导的VEGF121基因克隆的构建的开题报告.docx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-15 格式:DOCX 页数:2 大小:10KB 金币:10 举报 版权申诉
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AD载体介导的VEGF121基因克隆的构建的开题报告选题背景血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)是一种调节血管形成和修复的强有力的因子。VEGF的亚型包括VEGF121、VEGF165、VEGF189和VEGF206,其中VEGF121是最小的亚型,含有121个氨基酸。VEGF121被认为是肿瘤血管生成的极其重要的因子,应用它可以促进肿瘤的血管生成并提高其生长。近年来,很多研究表明,向肿瘤细胞中转移VEGF121的基因,可以在治疗肿瘤的过程中获得显著的治疗效果。为了尽可能地发掘VEGF121的潜在治疗效果,本研究拟使用AD载体对VEGF121基因进行克隆,使用细胞转染技术把其引入目标细胞内,从而获得更好的治疗效果。研究目的本研究旨在通过构建AD载体介导VEGF121基因的克隆,进一步研究VEGF121对肿瘤生长的影响,为肿瘤治疗提供新的思路和方法,探索临床转化价值。研究方法1.酶切片段选择根据NCBI数据库中VEGF121的序列,设计引物扩增出目标基因,并保证引物的特异性。随后,将所扩增的目标基因进行酶切,得到合适的片段大小。2.克隆目标基因将所得到的合适片段的VEGF121基因和AD载体进行连接,形成重组质粒。接着,将重组质粒转化到大肠杆菌中,筛选出所需的克隆子。3.检测克隆效果通过PCR方法检测所克隆的基因是否得到了正确的构建,并进行质粒测序,确保所构建的质粒序列正确无误。4.细胞转染实验使用细胞转染技术将所构建的AD载体介导的VEGF121基因引入目标细胞内,分别检测细胞的增殖、凋亡和迁移情况。预期结果预计可以成功构建出AD载体介导的VEGF121基因,并成功将其引入目标细胞内。通过监测目标细胞的增殖、凋亡和迁移情况,预期可以发现VEGF121对肿瘤生长的影响,为临床治疗肿瘤提供新的思路和方法。