饥饿和饱食对肝糖原的影响(yǐngxiǎng)实验实验(shíyàn)目的实验(shíyàn)原理本实验采用蒽酮显色法测定肝糖原含量。肝组织置于浓碱中加热，破坏其他成分而保留肝糖原；再用浓硫酸脱水生成糠醛衍生物；后者与蒽酮作用而形成蓝棕色化合物，且在620nm处具有强的吸光性。在一定条件下，颜色的深浅与肝糖原的含量成正比，可与同法处理的标准葡萄糖溶液进行(jìnxíng)比色定量。实验材料小白鼠：饥饿与饱食，每两组各一只。器材(qìcái)：刻度吸管、水浴锅、722型分光光度计、手术剪刀、镊子等。试剂：0.9%NaCl；30%NaOH；葡萄糖标准溶液（0.1mg/ml）；蒽酮显示液与浓硫酸混合液。操作步骤实验动物(dòngwù)的准备选择体重>25g的健康小白鼠，随机分成两组：（1）饥饿组：实验前严格禁食30h（单独放置于铁丝笼中，不要用锯木屑铺垫，以免小鼠啃食而影响实验结果，只给饮水）。（2）饱食组：正常摄食、饮水。2.处死动物用颈椎脱位法处死动物，立即剖腹取出肝脏，0.9%NaCI溶液冲洗血污(xuèwū)后，用滤纸吸干水分，准确称取饥饿鼠肝组织0.6g，饱食鼠肝组织0.4g（称重量不同以避免测量的吸光度值过高或过低）。右手拉住鼠尾用力向后拉，同时左手(zuǒshǒu)拇指和食指用力向下压住鼠头，将脊髓与脑髓拉断，小鼠便立即死亡。肝脏(gānzàng)3.糖原提取取15ml大试管2支，分别编号，各加入1.5ml的30%KOH，将称取的饥饿和饱食小鼠肝组织分别放入上述2支试管中。置沸水浴中煮沸20min，每隔5min振摇试管1次。待肝组织全部溶解后取出冷却，将各管内容(nèiróng)物分别、全部移入2只100ml容量瓶中（用蒸馏水洗涤试管，一并收入容量瓶内），蒸馏水定容至刻度，仔细混匀。4.糖原测定取试管(shìguǎn)4支编号，按下表操作:结果(jiēguǒ)与计算注意事项：感谢您的观看(guānkàn)！内容(nèiróng)总结