PLCε特异性shRNA对人膀胱癌BIU-87细胞增殖效应的实验研究的任务书.docx
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PLCε特异性shRNA对人膀胱癌BIU-87细胞增殖效应的实验研究的任务书任务书背景介绍:PLCε是一种在信号转导中起着重要作用的蛋白酶C(PKC)家族成员。PLCε广泛分布于许多组织中,并且已知在许多肿瘤中有不同程度的表达。PLCε在癌症的发生和发展中扮演了重要的角色,它参与了细胞的增殖、转化、迁移和侵袭等生物学过程。赖氨酸酶是一种新型RNA干扰技术,通过介导的靶向信使RNA的降解,可以降低或沉默特定蛋白质的表达。由于PLCε在癌症的发生和发展中起着重要作用,因此此次实验旨在研究PLCε特异性shRNA对人膀胱癌BIU-87细胞增殖效应的影响。任务目的:本实验旨在探究PLCε特异性shRNA对人膀胱癌BIU-87细胞增殖效应的影响,并分析PLCε在BIU-87细胞增殖中的作用机制,为阐明肿瘤细胞的基本生物学特征以及开发潜在的治疗方法提供理论参考。任务内容:1.文献综述收集、整理分析PLCε在癌症发生和发展中的作用机制、RNA干扰技术的基本原理及应用。2.实验设计选取PLCε在BIU-87细胞中表达较高的序列,设计制备PLCε特异性shRNA。将PLCε特异性shRNA侵染到BIU-87细胞中,比较shRNA组与对照组细胞的增殖情况、形态变化等。3.生物学特性分析比较shRNA组与对照组的增殖速度、增殖曲线、细胞周期分布、凋亡率等,分析PLCεknockout对BIU-87细胞增殖的影响。4.分子机制探究分析PLCε特异性shRNA对BIU-87细胞生长、凋亡等生物学特性的影响。分析PLCε特异性shRNA对线粒体膜电位、线粒体膜透性转变、凋亡相关蛋白(caspase3、Bax和Bcl-2等)的表达等重要生物学参数的影响。5.结果分析和展望分析实验结果,得出实验结论。最后,针对实验结果进行展望,提出未来进一步的研究方向和思路。任务要求:本任务要求实验设计合理、步骤清晰、方法科学,文献综述全面准确。要求有根据的提出实验问题和展望,能够清晰准确地表达实验设计和实验结果分析。实验难度较高,须认真对待,密切跟进实验进展,及时处理实验过程中的各种问题和困难。实验结果需遵循科学规律和研究者的职业道德,不作弄虚作假的行为。文献综述和实验报告需按照学院规定的格式要求进行撰写。参考文献:[1]Ye,D.,García-Manero,G.,Kantarjian,H.M.,Xiao,L.,Fernandez,M.H.,Medeiros,L.J.,…Loghavi,S.(2019).Analysisofclinicopathologicandmolecularfeaturesinpatientswithmyelodysplasticsyndromesandacutemyeloidleukemiawithinv(3)(q21q26.2);t(3;3)(q21;q26.2).LeukemiaResearch,76,46–51.[2]摩尔根·克拉克,莫林·加顿(MorganC.Clark,MaureenA.Gannon).RNA干扰的基本原理与应用.2007.[3]PolakisP.Wntsignalingandcancer.GenesDev.2000;14(15):1837-1851.doi:10.1101/gad.14.15.1837[4]LiY,HuangTT,CarlsonJ,etal.Dilinoleoylphosphatidicacidmediatesreducedglutamateuptakeandglutamate-inducedapoptosisinculturedcorticalneurons.JNeurochem.2005;95(3):716-727.doi:10.1111/j.1471-4159.2005.03418.x
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