人工血管携腺病毒介导血管内皮生长因子基因对内皮细胞功能的影响的任务书任务简介：人工血管的研究已经成为血管外科和血管再生医学领域的热点研究方向。人工血管具有无血型限制、不容易被感染、可定制化、可再生等优点，大大改善了传统血管移植的局限性。然而，长期使用的效果仍有待进一步提高。内皮细胞是人工血管远期使用的限制因素之一，因此，探究内皮细胞在人工血管中的生物学特性，特别是其功能的影响因素和其作用机制，对人工血管的长期使用有重要意义。现在任务的目标是研究腺病毒（Ad）介导血管内皮生长因子（VEGF）基因对人工血管内皮细胞功能的影响。该任务的主要研究内容包括:1.制备人工血管，检测血管内皮细胞的基本生物学特性；2.构建腺病毒表达载体，细胞转染，检测内皮细胞对VEGF表达的响应；3.研究VEGF基因转染内皮细胞对其增殖、迁移、管腔形成和Ang-1、Ang-2的表达等生物学功能特性的影响。主要技术路线：1.人工血管的制备：选择生物兼容性良好的材料，如聚乳酸（PLA）和聚羟基乙酸（PHA），通过旋转镀膜或模具法制备具有微细腔道结构的载体，再将载体进行表面修饰，如胶原、明胶等；2.VEGF基因的表达：采用PCR扩增VEGFcDNA，将其克隆到腺病毒表达载体中，转染内皮细胞，通过荧光显微镜、Westernblot和ELISA等方法检测VEGF基因的表达。3.内皮细胞功能的评价：通过MTT、Transwell、Matrigel等实验评价内皮细胞的增殖、迁移、管腔形成和Ang-1、Ang-2的表达等特性。预期结果：通过本研究，可以深入探究VEGF基因对内皮细胞功能的影响，为人工血管的长期使用提供理论依据和实践方法，为临床血管再生医学提供新思路和新方法。