生物高一生物微生物的实验室培养学习PPT教案.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPTX 页数:70 大小:1.9MB 金币:10 举报 版权申诉
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细菌的外形与大小细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌(纤)毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质,细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。*细胞壁芽孢菌落:菌落放线菌链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素病毒的结构病毒SARS病毒、禽流感病毒朊病毒(蛋白质病毒)2、病毒的增殖:真菌生殖细菌的营养类型了解有关培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。一、基础知识:2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)选择培养基根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低缺点:缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。优点:营养成分丰富,培养效果好缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;血清中含有:①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)②多种金属离子;③激素;④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分液体培养基:固体培养基:菌落,菌苔半固体培养基:4.培养基的用途(二)无菌技术(1)消毒定义:利用化学或物理方法,杀死大部份致病微生物的过程。区分为高程度消毒(High-levelDisinfection)、中程度消毒(Intermediate-levelDisinfection)、低程度消毒(Low-levelDisinfection)三种方式。(2)灭菌的定义:1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源4、紫外线消毒……1、灼烧灭菌2、干热灭菌:160-170℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌:100kPa、121℃下维持15-30min.最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染,试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口,通常采用棉花塞,也可采用各种金属、塑料及硅胶帽,它们只可让空气通过,而空气中的其他微生物不能通过。而平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。分类3.微生物实验室培养的基本操作程序1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?三、实验操作1.计算、称量2.溶化3.调pH:pH7.64.过滤:这一步可以省去。5.分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。6.加塞7.包扎8.灭菌:将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170℃下灭菌2h。9.倒平板:待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作见课本)2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.10.无菌检查:将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。倒平板技术1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?2、纯化大肠杆菌问题讨论2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?问题讨论微生物的恒温培养微生物的恒温培养菌种的保存四、课题成果评价本课题知识小结:【典例解析】例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前编号(3)若除去成分②,加入(CH2O),该培养基可用于培养。(4)表中营养成分共有类。(5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是。(6)右表中各成分重量确定的原则是。(7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是。细菌的外形与大小细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌(纤)毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质,细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。*细胞壁病毒选择培养基根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低缺点:缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。液体培养基