PDK1基因敲除小鼠中与心衰相关的长链非编码RNA(LncRNA)的筛选的开题报告一、研究背景和意义心衰是一种严重的心脏疾病，其发生与多种因素有关，包括遗传因素、环境因素以及生活方式等。长链非编码RNA（LncRNA）是一类长度大于200nt的RNA分子，不编码蛋白质，可以通过调节基因表达，参与多种生物学过程，如细胞增殖、分化和信号传导等。前期研究表明，LncRNA与心血管疾病密切相关。然而，LncRNA在心衰发病机制中的具体作用仍然不清楚。PDK1是一种蛋白激酶B（AKT）活化的关键酶，通过调节心肌细胞代谢和增殖来维护心脏功能。前期研究表明PDK1在心衰中发挥重要作用，但与其相互作用的LncRNA尚未完全阐明。通过筛选心衰相关的LncRNA，可以深入了解其作用机制，从而为心衰的诊断和治疗提供新的思路和方法。二、研究内容和方法本研究将利用PDK1基因敲除小鼠心脏组织中的转录组学技术，筛选心衰相关的LncRNA，并对其表达进行定量PCR验证。1.建立PDK1基因敲除小鼠模型从基因敲除小鼠库中选取PDK1基因敲除小鼠进行繁殖，并利用PCR和Westernblotting等技术检测敲除效果。2.转录组学分析收集PDK1基因敲除小鼠和野生型小鼠的心脏组织，从中提取RNA，构建RNA-seq文库，利用高通量测序技术对文库进行测序，筛选与心衰相关的LncRNA。3.表达验证利用定量PCR技术验证筛选出的LncRNA的表达水平，并与野生型对照组进行比较分析。三、预期结果和意义本研究将通过筛选心衰相关的LncRNA，深入了解其作用机制，从而为心衰的诊断和治疗提供新的思路和方法。同时，本研究还将为进一步探究PDK1与心衰的关系提供基础数据。