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会计学目的(mùdì)要求通过实验掌握水样的采集和水样中细菌总数测定的方法。实验(shíyàn)原理1、水中细菌总数的测定(cèdìng)水中的细菌总数越多,说明水中有机物的含量就越高,水体被有机物污染的程度越重。水中细菌的种属繁多,以一定的培养基平板上生长出来的菌落,计算出来的水中的细菌的总数实际上是一种近似值。绝大多数腐生性和致病性的细菌,可在肉膏蛋白胨培养基上进行生长。因此应用平板菌落计数技术来测定(cèdìng)水样中的细菌总数基本上能代表水样中细菌的数量。水中细菌(xìjūn)总数的测定和计算器材操作步骤2、细菌(xìjūn)总数测定(1)自来水A、用灭菌管吸取1ml水样,注入灭菌培养皿中,做两个皿。B、分别倾入约15ml已溶化并冷却到45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基,在桌上作平面旋摇,使水样与培养基充分混匀。C、另取一空的灭菌培养皿,倾入约15ml肉膏蛋白胨琼脂培养基,作空白对照。D、培养基凝固后,倒置于37℃中,培养24h,进行菌落计数。(2)湖水A、稀释水样:a、取3个灭菌空试管,分别加入9ml灭菌水。b、取1ml水样注入第一(dìyī)管9ml灭菌水内、摇匀。c、再自第一(dìyī)管取1ml至下一管灭菌水内,如此稀释到第三管,稀释度分别为10-1,10-2,10-3。B、自三个稀释度的试管中各取1ml稀释水加入空的灭菌培养皿中,每一稀释度做两个培养皿。C、各倾入约15ml已溶化并冷却到45℃左右的肉膏蛋白(dànbái)胨琼脂培养基,在桌上作平面旋摇,使水样与培养基充分混匀。D、培养基凝固后,倒置于37℃中,培养24h,进行菌落计数菌落(jūnluò)计数(2)首先(shǒuxiān)选择平均菌落数在30-300之间的,当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的细菌总数,见例1。(3)若有两个稀释度的平均菌落数均在30-300之间,则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2,采取(cǎiqǔ)两者的平均值,若大于2,则取其中较小的菌落总数,见例2和例3。(4)若所有(suǒyǒu)稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数,见例4。(5)若所有(suǒyǒu)稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数,见例5。(6)若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间,则以最近(zuìjìn)300或30的平均菌落数乘以稀释倍数,见例6。思考题内容(nèiróng)总结