实验七食品微生物检验（一）菌落总数测定生科1B2组吴晓燕吴泳贤许佳妮杨安琪一、实验目的1．学习水样的采集和水样中细菌总数的测定方法。2．了解和掌握平板菌落计数的原则。二、实验原理水中细菌总数的测定是进行水质检验的必要项目之一，主要作为判定饮用水、水源水、地表水等被污染程度的标志。本试验采用平板菌落计数技术来测定水中的细菌总数。该法是根据在固体培养基上所形成的菌落来进行计数。菌落总数是指在一定条件下，1mL水样所生长出来的细菌菌落的总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其它生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基和在一种条件下，使水中的所有细菌均能生长繁殖，因此，这种方法所得到的结果只是一种近似值。目前一般采用营养琼脂培养基，在需氧条件下，37℃培养36-48h，所得到的细菌绝大部分是腐生性的嗜中温性需氧菌和兼性厌氧菌。三、实验材料1．检样：矿泉水、自来水。2．培养基：营养琼脂培养基（牛肉膏蛋白胨琼脂培养基）3．仪器与其它用具：三角烧瓶，广口瓶，吸管，培养皿，试管，培养箱等。四、实验步骤1.水样的采集与处理⑴矿泉水：采样前，先用酒精棉球擦拭瓶口灭菌，以灭菌移液管或移液枪取水样。⑵自来水：先将水龙头用酒精擦拭、灭菌，然后再放水5—10分钟，最后用无菌容器接取水样。（3）水样采集后应立即检验，2.细菌总数的测定⑴自来水：用灭菌吸管吸取1mL水样，涂布于事先准备好平板中，共做2个平皿。分别倾注约15ml已溶化并冷却到45℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，并立即放在平整的桌面上，作平面旋转摇动，使自来水与培养基充分混匀。另取一空的灭菌培养皿，不加自来水，倾注15mL~20mL牛肉膏蛋白胨培养基，作为空白对照。将平皿倒置于37℃培养箱内，培养24h,进行菌落计数。两个平板的平均菌落数，即为1ml自来水的细菌总数。矿泉水：步骤如上。五、实验结果将实验数据填入下表，并报告所检测水样的细菌总数。1.自来水平板菌落数自来水中细菌总数（个/mL）2.矿泉水平板菌落数自来水中细菌总数（个/mL）3、空白对照平板的结果：