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会计学光的基本知识二.光的性质:粒子性——光子(光量子)波动性——光沿直线传播,在与它前进方向垂直的平面内呈波形振动三.光的吸收(一)荧光—物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光荧光是冷光,颜色为蓝、绿、红和黄色无论那种荧光,其发光机理是相同的3.荧光素(荧光物质,荧光染料,荧光探针)—能够产生荧光的化合物斯托克斯位移(Stokesshift)hvEX—hvEM=荧光效率利用斯托克斯位移现象,分离激发光和发射光4.荧光素的性质(2)激发光谱和发射光谱激发光谱和发射光谱的用途(3)荧光强度(4)荧光寿命/荧光物质受激发时,其发射荧光的能力逐渐下降并最终丧失——漂白荧光染料的发展简史常用的荧光染料(探针)二.细胞骨架荧光探针三.研究钙调节和活性的荧光探针四.其它荧光探针绿色荧光蛋白(GFP)及其衍生物GFP的特性与优点GFP,CFP,BFP,YFP商品化质粒转基因动物:Greenmouse外源基因的报告基因:将外源基因与GFPDNA相连,可实时监测外源基因的表达.检测细胞能否表达某一基因:将待测基因的启动子与GFPDNA相连,可实时监测细胞能否表达兴趣基因.GFP-蛋白融合技术:将结构蛋白基因与GFPDNA相连可实时监测结构蛋白的表达亚细胞结构的形成荧光检测仪器3.流式细胞仪(FCM)4.小动物活体成像系统KCL诱导的细胞外Ca++内流测量