荧光分析法在药物分析中应用学习教案.ppt
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPT 页数:27 大小:1.3MB 金币:10 举报 版权申诉
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20世纪70年代以来,特别是近年来相继出现的各种灵敏度高的荧光分析法已有效地用于药物制剂以及生物体液中药物的分析。如同步扫描荧光技术可用于违禁品中苯丙胺和吗啡加奎宁的测定;荧光偏振免疫分析法可用于血清中的庆大霉素、地答新、茶叶碱、五巴比妥、苯巴比妥等多种药物的检测,还可进行烧伤患者体内萘替米星的药代动力学研究;特异性荧光偏振免疫法可用来监测肾移植后环孢素A的全血浓度;荧光猝灭法用来测定苦参碱和氧化苦参碱的含量;固体表面荧光测定法用于血清中茶叶碱,以及其它多种抗菌药、抗气喘病药、抗惊风病药等的临床荧光分析;电解荧光光度法测定片剂中卡马西平的含量等等。其中,荧光探针技术已经发展成为借助荧光显微镜在分子水平上进行实时检测的重要(zhòngyào)手段。这种技术灵敏度高,可视性强,而且对研究的生物大分子或细胞干扰少,因此得到广泛应用。荧光(yíngguāng)分析法的特征:一该物质(wùzhì)必须具有与所照射光线相同频率的吸收结构;二该物质(wùzhì)吸收了与其本身特征频率相同的能量之后,必须具有一定的荧光量子产率。几种(jǐzhǒnꞬ)常用于药物分析的荧光分析法:对于有些药物的测定可以利用(lìyòng)其对某一特定的有荧光性的体系的荧光淬灭作用对其进行定量分析和测定。庞志功等建立了测定苦参碱和氧化苦参碱的荧光分析方法。荧光淬灭法还用于对梭基苯丙酮酸、司帕沙星、甲硝哇等药物的含量进行分析。日常生活中,大部分药物(yàowù)没有荧光性。衍生化荧光分析就是借助化学反应将待测的某种药物(yàowù)接上某种特定的化学基团,去掉某种化学基团,或者改变某种特定基团,己达到改变待测药物(yàowù)的物质结构,从而改变待测药物(yàowù)的荧光特性之目的,提高待测物灵敏度的分析方法。胶束增敏荧光分析法是在胶束溶液中对药物的含量进行测定的荧光分析方法。表面活性剂的作用之一是在溶液中产生胶束环境,胶束环境对物质分子有如下作用:(l)胶束环境对分子极性较小的弱荧光物质具有一定程度的增溶作用,所以对于此类物质,可用表面活性剂作为增溶剂;(2)胶束环境对有一定荧光性质的物质分子的荧光发射具有增敏增稳作用,因此,对于此类物质,可用表面活性剂对其作用,使其起到增敏增稳的效果。综合以上分析,对于某些几乎没有荧光性或荧光性很弱的药物用直接荧光方法无法进行分析测定时,可以通过使用表面活性剂产生胶束环境,从而(cóngér)使该药物的荧光强度得到一定程度的增强。荧光动力学分析法主要包括催化荧光动力学和非催化荧光动力学两种类型。催化荧光动力学法是以催化反应为基础来测定某种物质浓度或者含量的方法(fāngfǎ)。非荧光动力学催化法是通过测量非催化反应的速率而测定某种反应物(分析物质)的浓度或者含量,常用于一些有机物质的分析测定。物质分子吸收辐射光后,分子中的电子从最高占有轨道转移到该物质的另一个最低空轨道中,这种转移的过程叫电荷(diànhè)的转移。能形成电荷(diànhè)转移的物质分子必须有两部分,一个为电子给予体,另一个为电子接受体。近年来,荷移荧光光谱法在药物分析中得到了非常广泛的应用。文献报道用荷移荧光光谱分析法测定的有洛美沙星、加替沙星、环丙沙星、诺氟沙星、吡哌酸等药物。同步扫描技术与常用的荧光测定方法最大的区别是同时扫描激发和发射两个单色器波长。由测得的荧光强度信号与对应的激发波长(或发射波长)构成光谱图,这种用同步扫描技术得到的光谱称为同步荧光光谱。同步荧光分析法按光谱扫描方式的不同可分为恒(固定)波长法、恒能量法、可变角法和恒基体法。和常规荧光分析法相比,同步荧光分析法具有谱图简化、选择性提高、光散射干扰减少等特点,它不仅可以对单一的药品(yàopǐn)进行分析,如异黄嘌呤、甲氧苄啶、依诺沙星等,还可以同时测定多种结构相似的药品(yàopǐn)。几种荧光(yíngguāng)分析的新技术和新方法:化学计量学是数学、统计学、计算机技术和化学相结合的交叉学科。荧光分析法易受到散射光的干扰(gānrǎo),无法同时分析混合物。化学计量学正好解决了这个问题。荧光分析法的发展(fāzhǎn)方向:1)进一步系统地寻求和合成专属性强、灵敏度更高、效果更好的荧光探针;2)开辟多组分药品物质同时快速、准确检测的方法以及深入研究其反应机理;3)与计算机技术紧密结合,研制出自动化程度高,获得(huòdé)和处理信息速度快、检测速度更快、效果更好的荧光分析仪器;4)逐步加强与其他各种现代化的分析仪器和方法联合使用,以更准确、更灵敏更专一和更低检测限获得(huòdé)药物相关信息,迅速测出药物的含量和检出限。小动物(dòngwù)活体成像技术1、可见光成像这个(zhège)技术主要应用于药物研发的以下几个方面:1.观察肿瘤细胞的早