7.1生物技术与种植业7.1.1生物技术在诱导植物雄性不育中的利用杂交制种(三系法)袁隆平7.1.1.2基因工程诱导植物雄性不育花粉绒粘层表达barnase基因阻断花粉正常的发育而造成败育，形成不育系；花粉绒粘层表达bastar基因转化植株中为恢复系形成的二系配套的油菜、烟草。反义RNA技术创造了拟南芥、玉米、油菜等植物不育系。7.1.1.3原生质体融合创造不育系萝卜与油菜的原生质体融合而产生的细胞杂种——萝卜质油菜，在一般环境条件下表现为“雄性不育”。匈牙利国家自然科学院Menczel等（1982）以链霉素抗性基因作标记在烟草品种间进行原生质体融合，实现了烟草细胞质雄性不育基因的转移。7.1.2生物技术培育抗逆性作物品种7.1.2.1培育抗除草剂作物农田化学除草已成为全球现代农业生产的重要组成部分,全世界除草剂的总用量、施用面积及费用均已超过杀虫剂与杀菌剂。随着大量除草剂的出现,新品种选育和开发难度极大。因此,利用基因工程培育植物的抗除草剂品种越来越受到国内外科学家的关注,它不仅可扩大现有除草剂的应用范围,选用高效率、低毒、低残留、杀草谱广、低成本的除草剂转基因作物,也可减少环境污染,降低农业生产成本。抗EPSP抑制剂基因草甘膦(glyphosate)是一种广谱除草剂,它具有无毒、易分解，无残留和不污染环境等特点，目前已从细菌中分离出一个突变株，它含有抗草甘膦的EPSP合成酶突变基因。把抗草甘膦基因引入植物，可使这种基因工程作物获得抗草甘膦的能力。此时若用草甘膦除草，则可选择性地除掉杂草，而这种作物因不受损害而生长。抗PPT基因膦丝菌素(phosphinothricin，PPT)用作非选择性的除草剂,是植物谷氨酰合成酶(glutaminesynthetase,GS)的抑制剂。现已从Streptomyceshyrscopicu中分离得到抗bialaphos的bar基因，该基因编码的产物称PAT,嵌合的bar基因在CaMV35s启动子的控制下,在烟草、马铃薯和番茄的细胞内得到了表达，转基因植株对高剂量的PPT和bialaphos具有耐受性。生物技术与农业7.1.2.1培育抗除草剂作物7.1.2.2培育抗病虫作物化学革命给人类带来了农药，农药对人类的发展确实起了重要的作用，但同时也带来了不少严重的问题，如农药的残留在食物链的各个层次富积，危害环境及人类。同时杀虫剂的大量使用，使大量天敌和益虫也蒙受毒害，生物的多样性降低。农药的长期使用，使昆虫及病原体产生抗性，使杀虫剂的应用越来越形成恶性循环。抗病虫转基因作物的益处：是一种无环境污染的防治策略，可显著减轻农业对化学农药的依赖，有助于可持续农业系统的建立。农药具有时间上的连续性和空间上的整体性。抗性基因的来源广阔，不受不同生物个体间生殖隔阂的限制，可以在整个生物体中挑选、组合目的基因。育种周期短，治虫成本低。转Bt毒蛋白基因作物苏云金杆菌（Bacillusthuringiensis，Bt）是一种来源于土壤的微生物，具有高度的杀虫活性，被作为生物农药商品化应用。Bt之所以能杀虫，是因为其芽孢形成过程中可产生一种杀虫结晶蛋白（ICP）。这种毒蛋白对鳞翅目昆虫有特异的毒性作用。它在昆虫消化道内的碱性条件下，裂解成为活性多肽并造成昆虫消化道损伤，最终可使昆虫死亡，而对其他生物则无害。棉花害虫修饰的Bt毒蛋白转基因作物苏云金杆菌亚种Kurstaki中毒蛋白的晶体结构在大田条件下不稳定，在植物中的表达亦很不理想，因此为了提高表达水平，研究人员截短了该基因，使其仅表达毒素蛋白的N端部分。同时插入35S的启动子来控制该基因的表达，采取这两个办法后使得蛋白质的表达量略有提高。为了进一步提高表达量，人们将编码位于N端29～607位氨基酸残基之间的高度保守区域的基因片段进行克隆后，在细菌内表达，实验证明截短的蛋白质与天然蛋白活性相同，都能够抵御鳞翅目昆虫的侵害。人为设计、化学合成的完全修饰后的Bt毒蛋白基因。它采用植物偏爱密码子，并删除了可能形成mRNA二级结构的序列。改造过的基因的G+C含量高达49%（野生型基因是37％），核酸序列与野生型仅78.9%相同。用这种合成的Bt毒蛋白基因转化植物后，表达量比野生型基因要高100倍左右，并提高了杀虫活性。豇豆胰蛋白酶抑制剂豇豆胰蛋白酶抑制因子(cowpeatrypsininhibitor，CpT1)一个大约由80个氨基酸组成的小肽，属于Bowman-Birk类型的丝氨酸蛋白酶抑制剂。它的作用位点是酶的催化中心。这一位点的突变可能性甚小。因此可能减少害虫通过突变而产生对CpTl的耐受性，而且CpTl抗昆虫谱广，能抗鳞翅目、鞘翅目害虫等，几乎对所有的害虫有效，而对人畜无害。因此，CpTl比苏云金杆菌更有应用价值。几丁质酶基因工程