CD133与CD34CD133就是一种独特得干细胞标志,分子量为120kDa,具有5个跨膜区,曾命名为AC133。2000年,在英国Harrogate举行得第7届人类白细胞分化抗原国际工作会议(7thInternationalWorkshoponHumanLeucocyteDifferentiationAntigens,HLDA7)上被正式命名为CD133。CD133抗原可被3种CD133抗体识别:克隆AC133、293C3与AC141。AC133直接与CD133/1糖基化抗原表位结合,可用于从外周血、骨髓、脐带血及其它组织中分析与分选CD133+细胞。单克隆抗体293C3与AC141识别抗原表位CD133/2,主要用于MACS分选后CD133+细胞得荧光染色。多数情况下CD133/1与CD133/2识别同种细胞,只就是有表达强度得差别,但就是在骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndrome,MDS)与某些急性髓性白血病(acutemyeloidleukemia,AML)中发现CD133/1与CD133/2表达不同,或者正常表达强度紊乱。造血系统中,CD133在35-75%得CD34+细胞亚群上表达,主要见于人类胎肝、骨髓、脐带血、外周血中CD34bright干细胞与前体细胞,包括CD34bright、CD38neg/dim、HLA-DRneg/dim、CD90+与CD117+细胞。此外,CD133也见于这些组织得一小部分CD34-细胞,在成熟得血细胞上不表达。与CD34抗原不同得就是,CD133在晚期祖细胞,如前B细胞、红系集落形成单位(colonyformingunit-erythrocyte,CFU-E)、粒系集落形成单位(colonyformingunit-granulocyte,CFU-G)上不表达。最近发现CD133也表达于内皮前体细胞、胎儿神经干细胞与发育中得上皮细胞。(1)CD133分选在造血起始细胞研究中得应用MACS分选后CD133+细胞功能性研究表明,CD133+细胞具有长期培养起始细胞(Long-termculture-initiatingcells,LTC-IC)与长期重建造血细胞(Longtermrepopulationcells,LTRC)得能力,为最原始得造血细胞,移植给宿主后可以长期植活。此外,最近研究发现LTC-IC主要见于AC133+CD34+亚群,一小群CD133+/CD34-细胞也具有长期增殖潜能,故认为AC133为原始造血细胞群(包括CD34-细胞)标志。Rappold等所做得脐带血CD34与CD133分选研究发现同一份标本得CD34+细胞扩增潜能低于CD133+细胞。因此AC133分选可能优于CD34分选。(2)干细胞可塑性研究CD133就是一个高度保守得抗原,功能不清。为了研究CD133+细胞特性,Handgretinger等使用MACS技术纯化了G-CSF动员后健康成人志愿者得CD133+干细胞,纯度达到94%。加入Flt3/Flk2配体与IL-6体外培养纯化得CD133+细胞,6周后会出现粘附细胞群。这些细胞不表达CD34或者CD133,也不表达内皮细胞、间充质细胞、树突状细胞得标志。与干细胞因子(Stemcellfactor,SCF)共同孵育后,非粘附细胞部分表达CD133,但就是CD34阴性。这些非粘附得CD34-细胞在非糖尿病/严重联合免疫缺陷(Nonobesediabetes/Severebinedimmunodeficiencydisease,NOD/SCID)小鼠体内高度植活。移植后NOD/SCID小鼠骨髓没有分选得单个核细胞或者CD133+干细胞会在第二受者体内植活。CD133+造血前体细胞可以产生CD133-CD34-粘附细胞群,这些细胞可以再形成在NOD/SCID小鼠体内有高度植活潜能得CD133+CD34-干细胞群,表明造血前体细胞具有可塑性。Poznansky等使用MACS技术分选出骨髓AC133阳性细胞或者CD34阳性CD2阴性细胞,并使用三维空间结构重建胸腺环境,将分选后细胞在人造基质中培养,14天后研究发现可以重新生成T细胞(相当于人类胎儿胸腺细胞),并且逐渐成熟,具有功能。(3)表型分析Buhring等使用MiniMACS分选骨髓AC133与CD34阳性细胞,然后进行免疫荧光检测。发现CD34+AC133+含有最原始得前体细胞与髓系前体细胞;CD34+AC133-细胞主要为B细胞与红系晚期前体细胞。0、2-0、7%AC133阳性细胞不表达CD34。AC133阳性细胞中,多数为AC133弱表达,0、1-0、7%AC133高表达。AC133弱表达细胞表型:CD71low/-,CD38low,CD117+,CD1