受水稻纹枯病菌诱导表达OsWRKY基因的克隆及初步分析的任务书.docx
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受水稻纹枯病菌诱导表达OsWRKY基因的克隆及初步分析的任务书任务简述:本次任务是对于受水稻纹枯病菌诱导表达的OsWRKY基因的克隆及初步分析。任务主要分为以下几个步骤:1.设计引物:根据OsWRKY基因序列,设计克隆OsWRKY基因的引物。2.克隆OsWRKY基因:从水稻中提取RNA,利用RT-PCR技术,扩增出OsWRKY基因,并通过电泳检测确认克隆的正确性。3.质粒构建:将克隆得到的OsWRKY基因克隆至质粒中。4.菌株转化:将构建得到的质粒转化至大肠杆菌中,利用选择培养基筛选转化成功的菌株。5.酵母菌转化:将构建好的质粒转化入酵母菌中,进行酵母菌转化实验,利用蓝白斑筛选转化成功的酵母菌株。6.基因表达分析:通过荧光素酶活性的检测,分析转化的菌株以及酵母菌株表达OsWRKY基因的情况。7.初步功能分析:利用qPCR技术,分析表达OsWRKY基因的水稻植株与野生型植株的差异,初步探究OsWRKY基因的功能。任务要求:1.找到已公布的OsWRKY基因序列,并根据序列信息设计出引物。2.获取水稻样本,提取出RNA进行克隆实验。3.完成质粒构建、大肠杆菌转化、酵母菌转化等实验条件的准备,并进行转化实验。4.通过相应分子生物学技术对转化的菌株及酵母菌株进行鉴定,并分析其表达OsWRKY基因的情况。5.利用qPCR技术探究OsWRKY基因的功能,初步分析OsWRKY基因在水稻中的作用机制。6.注意实验过程中的安全问题,对实验用品进行正确处理、消毒,并做好实验记录和数据分析。