人工合成肺孢子菌p55蛋白串联基因的克隆表达及产物分析的任务书.docx
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人工合成肺孢子菌p55蛋白串联基因的克隆表达及产物分析的任务书任务概述:本项目旨在利用基因工程技术对肺孢子菌的p55蛋白进行合成和表达。具体任务包括克隆p55蛋白串联基因,构建表达载体,转化大肠杆菌、进行表达和纯化,最后对产物进行分析。任务分工:1.克隆p55蛋白串联基因:负责从肺孢子菌中提取DNA,扩增p55基因特异序列,进行PCR克隆并纯化PCR产物。2.构建表达载体:将p55基因插入表达载体中,进行限制性内切酶切和连接,生成重组表达载体。3.转化大肠杆菌:将重组表达载体转化到大肠杆菌中,筛选正常克隆菌株,并进行菌种的保存。4.表达和纯化:通过诱导表达,收集表达菌液,利用亲和层析和凝胶过滤等技术方法纯化表达产物。5.产物分析:对纯化的产物进行Westernblot和质谱等分析方法,评估表达产物的纯度和功能性。参考文献:1.MalloyJL,VeldkampPJ,JagelsM,etal.ExpressionofPneumocystiscariniip55andhigh-levelsynthesisofp55-specificmonoclonalantibodies.InfectImmun.1996;64(7):2767-2770.2.ZhangY,GaoZ,LiangY,etal.Cloning,expressionandidentificationofthefusionproteinofPneumocystiscariniip55andhepatitisBvirusPreS2.MolImmunol.2007;44(5):1110-1116.
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