体外侵袭实验分离高侵袭性和低侵袭性肾癌细胞的中期报告.docx
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体外侵袭实验分离高侵袭性和低侵袭性肾癌细胞的中期报告本实验使用Transwell侵袭试验对肾癌细胞进行分离。实验分为高侵袭性和低侵袭性两组,每组分别选取10个细胞进行实验。在实验前,先对细胞进行预处理:离心、洗涤、消化、计数、在细胞密度为5×105/mL的条件下进行各自的培养。实验操作如下:1.吸取细胞悬液10μL,加入40μL无血清培养基混合。2.将混合液均匀分配入8孔转移室孔内,每孔5μL。3.在转移室内滴加培养基,室内加满。4.受试组和对照组各进行一次,然后放到细胞箱内保温24h。5.细胞移动后,将培养基放弃,用RPMI-1640洗涤1次,然后用乙酸涂层1次。6.用100μL甲醛进行固定6-8min,然后放到室温下水龙头冲洗,照常染色。7.在显微镜下观察细胞形态和染色程度。实验结果发现,高侵袭性组的细胞穿过滤膜的数量明显多于低侵袭性组,且穿过滤膜的细胞呈现出更明显的分叶、拉长和扁平等侵袭性形态。这提示我们,Transwell侵袭试验可以分离出侵袭性不同的肾癌细胞,为研究肾癌侵袭及治疗提供了一种新的方法。