共表达dll4,p16基因真核表达载体构建及对白血病细胞的影响的任务书.docx
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共表达dll4,p16基因真核表达载体构建及对白血病细胞的影响的任务书任务书任务背景:白血病是一种白细胞恶性增生的疾病,严重威胁着人类健康和生命。在疾病的治疗过程中,基因治疗技术已成为一种新的治疗手段,其中基因转移是最为常见的一种方式。随着基因技术的不断发展,越来越多的基因成为了治疗白血病的新的靶点。DLL4基因和p16基因就是其中很有潜力的基因,它们在多种恶性肿瘤中都发挥着重要作用,因此本次任务的重点就集中在这两个基因的构建和对白血病的影响。任务内容:1.确定构建真核表达DLL4,p16基因的载体:选择合适的真核表达载体,对基因进行全长克隆和限制酶切,保证稳定高效地表达。2.构建真核表达DLL4,p16基因的质粒:将克隆的DLL4,p16基因插入到真核表达载体中,形成真核表达质粒。3.病毒质粒构建及包装:将真核表达质粒插入至病毒质粒中,通过相应的方法进行病毒包装。4.体外实验验证:通过体外实验验证白血病细胞中DLL4,p16基因的表达情况及其对细胞生长的影响。5.结果统计和分析:对实验所得结果进行统计和分析,分析DLL4,p16基因对白血病细胞的影响及其机制。任务要求:1.对基因技术的理论和实践有一定的了解。2.熟练掌握真核表达和质粒构建实验技术。3.学习并掌握病毒包装技术。4.对体外实验的操作具备一定的技术水平。5.具备实验结果分析能力。6.了解白血病的发病机理和治疗方法。7.任务完成后撰写清晰、准确、规范的任务报告。8.任务报告字数不少于1200字。任务计划:任务起止时间:xx年xx月xx日-xx年xx月xx日1.第一周:了解任务背景和任务内容,制定实验计划并确定实验细节。2.第二周:克隆DLL4基因,编写克隆方法和限制酶切方案。3.第三周:克隆P16基因,编写克隆方法和限制酶切方案。4.第四周:将DLL4基因和P16基因插入真核表达载体中,形成真核表达质粒。5.第五周:进行质粒酶切并进行质粒测序以确保正确性。6.第六周:将真核表达质粒插入至病毒质粒中并进行病毒包装。7.第七周:体外细胞培养及转染。8.第八周:提取RNA并进行逆转录PCR,检测DLL4基因和P16基因的表达情况。9.第九周:细胞增殖和凋亡分析。10.第十周:结果统计和分析。11.第十一周:撰写任务报告及PPT制作。12.第十二周:报告答辩。总结:本任务旨在构建真核表达DLL4,p16基因的质粒并对其在白血病细胞中的表达情况和生物学效应进行研究。通过该任务的实施,我们对基因技术的理论知识和实践技能得到了进一步的拓展和提升。同时,通过对基因治疗的研究,也为白血病治疗提供了新的思路和方法。
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