第十章吸光光度法化学分析法总结化学分析与仪器分析方法比较第一节物质对光的选择吸收磁场向量h－普朗克(Planck)常数6.626×10-34J·s－频率E－光量子具有的能量单位：J(焦耳)，eV(电子伏特)结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越长(频率越低)，光量子的能量越低。单色光：具有相同能量(相同波长)的光。混合光：具有不同能量(不同波长)的光复合在一起。电磁波谱的波段如何划分?高能辐射区γ射线能量最高，来源于核能级跃迁χ射线来自内层电子能级的跃迁光学光谱区紫外光来自原子和分子外层电子能级的跃迁可见光红外光来自分子振动和转动能级的跃迁波谱区微波来自分子转动能级及电子自旋能级跃迁无线电波来自原子核自旋能级的跃迁光学光谱区光学分析法及其分类(2)非光谱法：二。吸光光度法2。溶液中溶质分子对光的吸收3。物质对光的选择性吸收及吸收曲线Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱(AbsorptionspectraofCr2O72-、MnO4-)4.吸收光谱产生的原理分子的能级电子能级的跃迁分子的激发(Excitation)苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱(Absorptionspectraofbenzeneandtolueneincyclohexane)第二节光吸收基本定律3。朗伯-比尔定律2）吸光系数3）吸光度(A)、透光率(T)与浓度(c)的关系吸光度与光程的关系A=bc吸光度与浓度的关系A=bc4）摩尔吸光系数()的讨论（4）εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。ε>105：超高灵敏；ε=(6～10）×104：高灵敏；ε<2×104：不灵敏。（5）ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。5）朗伯-比尔定律的适用条件1)单色光:应选用max处或肩峰处测定2)吸光质点形式不变：离解、络合、缔合会破坏线性关系，应控制条件(酸度、浓度、介质等)3)稀溶液：浓度增大，分子之间作用增强例：亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱4朗伯-比尔定律的分析应用5。吸光度的测量与吸光度的加和性6。引起偏离朗—比定律的因素1）物理因素非单色光---实际光源为具有一定范围的光。非平行入射光---若入射光不垂直介质不均匀-----溶液不均匀，混浊、胶体等2）化学因素溶液浓度过高化学反应---分子缔合、解离等改变质点个数第三节吸光光度法及仪器2.光电比色法3.吸光光度法和分光光度计光路示意图分光光度计内部光的传播途径二。分光光度计的类型1．单光束分光光度计722型分光光度计结构方框图可见分光光度计可见分光光度计2．双光束分光光度计紫外-可见分光光度计U-3400型紫外-可见分光光度计3．双波长分光光度计三。分光光度计的主要部件单色器单色器光栅：光栅3.吸收池:用于盛待测及参比溶液。检测器光电管光电倍增管（160-700nm）光电倍增管5.指示器低档仪器：刻度显示中高档仪器：数字显示，自动扫描记录多通道仪器（Multichannelinstruments）镀铝反射镜纤维光度计第四节吸光光度分析法条件选择1)生色团（发色团）2)助色团3)红移和蓝移有机显色剂二。显色条件的选择2.显色反应酸度（cM、cR一定）邻二氮菲－亚铁反应完全度与pH的关系酸度的影响3.显色温度及显色时间4.干扰及消除测Co2＋(生成络合物性质不同)三。测量条件的选择1)仅络合物有吸收，溶剂作参比。如phen—Fe2+-------水2)待测液也有吸收，被测液作参比。如测汽水中的Fe----汽水3)显色剂或其它试剂也有吸收，空白溶液作参比例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的Fe，参比溶液为不含Fe的所有试剂。4)干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时：(1)掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比溶液.(2)加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比溶液.四。光度分析法的误差1。偏离Beer定律的因素1.光学因素讨论：2)反射光和杂散光的影响3)非平行光的影响2。准确度—仪器测量误差仪器测量误差浓度测量的相对误差与T(或A)的关系例1邻二氮菲光度法测铁，(Fe)=1.0mg/L,b=2cm,A=0.38，计算和第五节光度分析法的应用多组分的测定二。示差吸光光度法示差法标尺扩展原理：三。双波长分光光度法双波长分光光度法基本要求：双波长分光光度法消除干扰双波长分光光度法消除浑浊背景干扰四。导数分光光度法导数分光光度法导数分光光度法中药降压片中氢氯噻嗪含量的测定肝中茚满二酮类抗凝血杀鼠剂的固相萃取五。一元弱酸离解常数的测定MO吸收曲线MO离解常数的测定作图法六。络合物组成的测定(2)等摩尔连续变化法:表观形成常数的测定(设M、R均无吸收)七。光度滴定典型的光