去除外源氨基酸的K5突变体设计与功能研究的中期报告论文题目：去除外源氨基酸的K5突变体设计与功能研究的中期报告摘要：本研究旨在通过基因编辑技术，设计一种能够不依赖外源氨基酸的K5突变体，并探究其胞内氨基酸营养调节机制及生物学功能。研究已完成K5基因的敲除和突变，成功构建了K5+/+-K5-/+/K5-/-三种不同基因型细胞系。通过表型分析，发现与K5+/+细胞相比，K5-/-细胞生长缓慢，细胞周期延长，细胞形态变化，并且存在较高的凋亡率。进一步通过蛋白质组学分析，发现K5基因的敲除会影响多个信号通路和代谢途径。在此基础上，利用基因编辑技术构建了三种不同的K5突变体，分别是K5-M1、K5-M2和K5-M3。这些突变体均能够通过代谢通路补充外源氨基酸的需求，并且具有可重复的生长和细胞周期等生物学特征。进一步研究将探究这些突变体的氨基酸营养调节机制，以及其在细胞增殖、凋亡和分化等方面的功能变化。关键词：基因编辑技术；K5突变体；外源氨基酸；代谢通路补充；细胞增殖；细胞凋亡；细胞分化；蛋白质组学分析。