酵母转录因子Cdc73的结构生物学研究的任务书任务书任务名称：酵母转录因子Cdc73的结构生物学研究任务目的：1.理解转录调节机制的基本原理，深入探究酵母细胞中Cdc73在转录调节中的作用和机制。2.利用生物信息学方法及X射线晶体学技术，解析酵母转录因子Cdc73的结构，进一步揭示其作用机制。任务背景：Cdc73是一种关键的酵母转录因子，与TATA盒、启动子和RNA聚合酶II复合物等细胞中各种调控因素相互作用，控制基因转录调控过程中的速率和时机。Cdc73的N-和C-末端均含有结构域，参与转录调节过程的多个阶段。Cdc73与Paf1复合物、HistoneH3-lysine-4甲基转移酶和RNA聚合酶的亚单位Rpb1都存在相互关联，这种复杂的相互作用机制，是Cdc73发挥其调控作用的重要前提。任务内容：1.文献综述：调研Cdc73在酵母细胞中的结构特点、生物学功能及其调控机制。综合使用网络数据库，如PDB、GeneCards等，获取Cdc73的相关结构信息，了解其和其他蛋白质的相互作用关系。2.生物信息学分析：利用多种生物信息学工具和软件（如Swiss-Model、PyMOL、Rosetta等）对Cdc73的结构进行预测和分析，得出其三维结构模型。3.表达和纯化：基于Cdc73的序列信息，构建适合大规模生产的表达载体，并在宿主细胞（如大肠杆菌）中表达Cdc73蛋白。利用亲和层析等纯化方法纯化获得目标蛋白。4.结晶和解析：通过添加不同的化学物质和改变结晶条件等方法，筛选出最适合晶体生长的条件。通过X射线衍射技术，获取Cdc73蛋白的高分辨率晶体结构，揭示其空间构形和结构特点。5.结构解析及分析：基于已经获得的晶体结构数据，使用分子对接等技术对Cdc73和其他蛋白质的相互作用机制进行分析，探究Cdc73的功能和调控机制。任务时间：本研究的时间为6个月，具体的时间安排如下：第1-2个月：文献综述和生物信息学分析；第3-4个月：构建表达载体、表达和纯化Cdc73蛋白；第5-6个月：晶体结构研究和数据分析。任务负责人：XXX任务成员：XXX、XXX、XXX任务经费：本研究预计需要的经费为XXX元，主要用于购置试剂、培养细胞、维护设备等。具体经费分配如下：试剂：XXX元设备维护：XXX元实验室租金和设施：XXX元会议费用：XXX元任务评估：通过本次任务，需要达到如下目标：1.全面了解酵母细胞中Cdc73在转录调节中的作用和机制；2.成功获得Cdc73的晶体结构和相互作用机制，对其功能和调控机制有更为深入的理解。对于以上目标的实现情况，仪器、设备等使用情况以及任务执行时间等因素，我们将在任务执行结束后进行评估。