显微镜的构造、使用及显微计数.ppt
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-10 格式:PPT 页数:70 大小:10.8MB 金币:10 举报 版权申诉
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为什么要用显微镜?原理?如何使用显微镜?使用显微镜我们可以做什么?仅仅限于观察吗?显微镜的使用要知道的几个重要的分辨率(10X)罗伯特·虎克制造的显微镜(1665)放大倍数:140倍列文虎克和他的显微镜(约1680)2显微镜的光学原理2.2凸透镜的五种成象规律(1)当物体位于透镜物方二倍焦距以外时,则在象方二倍焦距以内、焦点以外形成缩小的倒立实象;(2)当物体位于透镜物方二倍焦距上时,则在象方二倍焦距上形成同样大小的倒立实象;(3)当物体位于透镜物方二倍焦距以内,焦点以外时,则在象方二倍焦距以外形成放大的倒立实象;(4)当物体位于透镜物方焦点上时,则象方不能成象;(5)当物体位于透镜物方焦点以内时,则象方也无象的形成,而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚象。2.3显微镜的成像原理显微镜和放大镜起着同样的作用,就是把近处的微小物体成一放大的像,以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。物体位于物镜前方,离开物镜的距离大于物镜的焦距,但小于两倍物镜焦距。所以,它经物镜以后,必然形成一个倒立的放大的实像A'B'。A'B'靠近F2的位置上。再经目镜放大为虚像A''B''后供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身,而是物体被物镜所成的已经放大了一次的像。为什么要用显微镜?原理?3显微镜的几个基本概念3.2分辨率(鉴别距离):显微镜能分辨的最小距离,用D表示。显微镜的鉴别距离越小,分辨率越高。D=0.61λ/nsinD:分辨率λ:光波的波长n:介质折射率α:物镜镜口角3.3孔径角:由标本上一点发出的进入物镜最边缘光线L和进入物镜中心光线OA之间的夹角称为孔径角。3.4数值孔径(N.A):令N·A=nsin,叫物镜的数值孔径。数值孔径与显微镜的分辨率有密切关系,越短,NA越大,分辨率越高。同样的倍数的物镜,数值越大,则光通亮越大,分辨率越高物镜数值孔径3.9工作距离工作距离也叫物距,即指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。在物镜数值孔径一定的情况下,工作距离短孔径角则大。数值孔径大的高倍物镜,其工作距离小。提高显微镜分辨率的方法:显微镜油镜使用的原理显微镜的结构光学显微镜基本结构:1.照明灯(Lamp)2.聚光器(Condenser)3.载物台和切片夹(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.推进器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.物镜(Objectives)6.粗细螺旋(Courseandfinefocusknob)7.目镜(Oculars)8.照相机等接口(Connectiontocamera,etc.)4.1物镜物镜(objective)是光学显微镜成像系统中决定其分辨率或叫分辨本领的最关键部件。(1)消色差物镜(achromat)色差校正使可见光中红光和蓝光聚焦于一点,而黄绿光则聚焦于另一点。能够消除光谱中红光和蓝光所形成的色差。这种物镜与目镜配用时可达到消色差物镜所要求的光学性能。(2)复消色差物镜(apochromat)是性能最高的物镜。能消除可视光中黄、红、蓝即包括几乎所有谱线在成像过程中所造成的色差。(3)平象物镜它们所成的影象基本上是平的,象场弯曲很小,不会发生视野中心与边缘不能同时准焦的现象,因此对目视观察及显微摄影都极为方便。平象物镜由于将弯曲的影象展平,在同样放大倍数下它成的影象比用一般物镜要大一点。在平象物镜的金属外框上,刻有Flanachr、planapo、plan等字样。(4)相差物镜相差物镜(Phasencontrastobjective)的一个透镜片上喷涂着一层环状金属膜板叫相位板。相位板是相差显微镜的关键部件。它和相差显微镜的聚光镜上的的环状光栏相配合使用。外壳上刻有Ph标记.物镜结构物镜标识像差色差球差校正色差校正4.2目镜目镜的作用是把物镜放大的实象再放大一级,并把物象映入观察者的眼中,实质上目镜就是一个放大镜。显微镜的分辨率能力是由物镜的数值孔径所决定的,而目镜只是起放大作用。对于物镜不能分辨出的结构,目镜放的再大,也仍然不能分辨出。4.3聚光镜聚光镜装在载物台的下方。小型的显微镜往往无聚光镜,在使用数值孔径0.40以上的物镜时,则必须具有聚光镜。聚光镜不仅可以弥补光量的不足和适当改变从光源射来的光的性质,而且将光线聚焦于被检物体上,以得到最好的照明效果。聚光镜光栏所谓光栏,从广义的角度可指一切限制入射光束截面的框孔都可认为光栏。聚光镜光栏作用(1)改变聚光镜的数值孔径以便与物镜的数值孔径相匹配,可调整图象的分辨率和反差。(2)辅助调整亮度。聚光器数值孔径