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核酸电泳相关试剂、缓冲液得配制方法50×TAEBuffer(pH8、5)组份浓度2MTris-醋酸,100mMEDTA配制量1L配制方法1、称量下列试剂,置于1L烧杯中。Tris242gNa2EDTA·2H2O37。2g2、向烧杯中加入约800ml得去离子水,充分搅拌溶解。3、加入57、1ml得乙酸,充分搅拌。4、加去离子水将溶液定容至lL后,室温保存.10×TBEBuffer(pH8、3)组份浓度890mMTris—硼酸,20mMEDTA配制量1L配制方法l、称量下列试剂,置于lL烧杯中。Tris108gNa2EDTA·2H2O7。44g硼酸55g2、向烧杯中加入约800ml得去离子水,充分搅拌溶解。3、加去离子水将溶液定容至lL后,室温保存。10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200rnMMOPS,20mMNaOAc,10mMEDTA配制量1L配制方法1、称41.8gMOPS,置于1L烧杯中.2、加约700mlDEPC处理水,搅拌溶解。3、使用2NNaOH调节pH值至7、0。4、再向溶液中加入下列试剂。1MNaOAc(DEPC处理)20ml0。5MEDTA(pH8、0)(DEPC处理)20ml5、用DEPC处理水将溶液定容至1L。6、用0.45m滤膜过滤除去杂质.7、室温避光保存。注:溶液见光或高温灭菌后会变黄.变黄时也可使用,但变黑时不要使用。溴乙锭(10mg/ml)组份浓度10mg/ml溴乙锭配制量100ml配制方法1、称量1g溴乙锭,加入到100ml容器中。2、加入去离子水100ml,充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。3、将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。4、溴乙锭得工作浓度为0.5g/ml。注意:溴乙锭就是一种致癌物质,必须小心操作.Agarose凝胶配制方法1、配制适量得电泳及制胶用得缓冲液(通常就是0、5×TBE或1×TAE)。2、根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当得锥形瓶中。3、加入一定量得电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶得50%容量)。注:用于电泳得缓冲液与用于制胶得缓冲液必须统一。4、在锥形瓶得瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。加热过程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套。小心摇动锥形瓶。使琼脂糖充分均匀熔化。此操作重复数次,直至琼脂糖完全熔化。必须注意,在微波炉中加热时间不宜过长,每次当溶液起泡沸腾时停止加热,否则会引起溶液过热暴沸,造成琼脂糖凝胶浓度不准,也会损坏微波炉。熔化琼脂糖时,必须保证琼脂糖充分完全熔化,否则,会造成电泳图像模糊不清.5、使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入溴乙锭溶液(终浓度0、5µg/ml)。并充分混匀。注:溴乙锭就是一种致癌物质.使用含有溴乙锭得溶液时,请戴好手套.6、将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3~5min之间。7、在室温下使胶凝固(大约30min~1h),然后放置于电泳槽中进行电泳。注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存2~5天。琼脂糖凝胶浓度与线形DNA得最佳分辨范围琼脂糖浓度最佳线形DNA分辨范围(bp)0、5%0、7%1、0%1、2%1、5%2、0%1,000~30,000800~12,000500~10,000400~7,000200~3,00050~2,0006×LoadingBuffer(DNA电泳用)组份浓度30mMEDTA36%(V/V)Glycerol0、05%(W/V)XyleneCyanolFF0、05%(W/V)BromophenolBlue配制量500ml配制方法1、称量下列试剂,置于500ml烧杯中。EDTA4.4gBromophenolBlue250mgXyleneCyanolFF250mg2、向烧杯中加入约200ml得去离子水后,加热搅拌充分溶解.3、加入180ml得甘油(Glycerol)后,使用2NNaOH调节pH值至7、0.4、用去离子水定容至500ml后,室温保存.10×LoadlngBuffer(RNA电泳用)组份浓度10mMEDTA50%(V/V)Glycerol0、25%(W/V)XyleneCyanolFF0、25%(W/V)BromophenolBlue配制置10ml配制方法1、称量下列试剂,置于10ml离心管中。0.5MEDTA(pH8、0)200µlBromophenolBlue25mgXyleneCyanolFF25mg2、向离心管中加入约4ml得DEPC处理水后,充分搅拌溶解。3、加入5ml得甘油(Glycerol)后,充分混匀.4、用DE