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10%(W/V,g/ml)过硫酸铵(APs)的配制:(100ml)1.称取10g过硫酸铵;2.加入100ml的去离子水,将固体粉末彻底溶解;3.贮存于4℃。注意:10%过硫酸铵最好现配现用,配好的溶液在4℃保存可使用2周左右,过期会失去催化效果。5×Tris-Glycine电泳缓冲液的配制:(1L)1.称取Tris粉末15.1g、Glycine(甘氨酸)94g、SDS5.0g;2.加入约800ml的去离子水,搅拌溶解;3.加去离子水定容至1L,室温保存。注意:加水时应让水延着壁缓缓流下,以避免由于SDS的原因产生很多泡沫。5×SDS-PAGELoadingBuffer的配制(方案一):(5ml)(本方案摘自Takara网站)组分:Tris-HClpH6.8(250mM);SDS(10%);溴酚兰(0.5%);甘油(50%);β-巯基乙醇(5%)配制过程:1.量取1MTris-HCl(pH6.8)1.25ml;甘油2.5ml;称取SDS固体粉末0.5g;溴酚兰25mg;2.加入去离子水溶解后定容至5ml;3.小份(500μl)分装后,于室温保存。4.使用前将25μl的β-巯基乙醇加入到每小份中去。5.加入β-巯基乙醇的上样Buffer可以在室温下保存一个月左右。5×SDS-PAGELoadingBuffer的配制(方案二):(10ml)(本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明)组分:Tris-HClpH6.8(60mM);SDS(2%);溴酚兰(0.1%);甘油(25%);β-巯基乙醇(14.4mM)配制过程:1.量取1MTris-HCl(pH6.8)0.6ml;50%的甘油5ml;10%的SDS溶液2ml;1%的溴酚兰1ml;2.加入去离子水定容至10ml;3.分装;4.在4℃可保存数周,-20℃可保存数月之久。以上两种上样Buffer的配方不太一样,你还可以参考下面这个配方2×SDS凝胶加样缓冲液组分(摘自《分子克隆》第三版)Tris-HClpH6.8(100mM);SDS(4%);溴酚兰(0.2%);甘油(20%);β-巯基乙醇或二硫苏糖醇(200mM)不含硫代试剂的加样Buffer可在室温保存。β-巯基乙醇或二硫苏糖醇临用前加入。