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动物源胰激肽释放酶的纯化的中期报告动物源胰激肽释放酶(trypsin)是一种重要的蛋白水解酶,具有广泛的应用价值。为了研究其生物学功能和进一步应用,需要对其进行纯化。本实验的目的是从豆科豆腐中纯化出动物源胰激肽释放酶。实验步骤如下:1.制备豆腐提取液。将豆腐加入pH7.5的磷酸盐缓冲液中,以50mL/g的比例离心。提取液收集后放置于0°C冷藏。2.离子交换层析。将提取液与DEAE-52柱平衡,然后按照相应的NaCl浓度梯度洗脱。3.凝胶过滤层析。将DEAE-52柱洗脱的纯化物进一步经由SephadexG-100柱层析,洗脱Elu01藏于分子量大于15kDa的组分内。4.1.SDSPAGE分析纯化效果。4.2.测定酶活力,活力比值可达到165通单位/L。初步结果显示,通过离子交换和凝胶过滤层析分别获得了SephadexG-100柱的Elu01纯化产物。分子量比值为大于15kDa的组分的比值可以达到85%以上。对纯化效果进行SDS-PAGE电泳,结果分析和纯化效果非常一致,说明了纯化的有效性。下一步是进一步提取和分析Elu01分液的组成资讯。