临床检验基础实验课复习.doc
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基本仪器毛细吸管:10μl、20μl改良牛鲍(Neubauer)计数盘:1个计数池(3x3x0.1mm)=9个大方格中央1个大方格(1x1x0.1mm)=25个中方格=400个小方格=1μl四角1个大方格,平分为16个中方格3、采血管:紫色:EDTA-K2血常规检查黑色:3.2%枸橼酸钠与血比例1:4血沉检查血液检验一、血涂片染色血涂片:玻片不洁角度速度血滴推片边缘缺口推片边缘弧形空泡过大:厚过小:薄快:厚短慢:薄长堆积尾部不匀:厚薄相间过大:厚小:薄条样缺损中央薄两头厚尾尖瑞士染色瑞氏染料:伊红(碱)、亚甲蓝(酸)缓冲液:磷酸盐缓冲液(pH6.4-6.8)时间:染料(I液):5d左右,0.5-1min缓冲剂(II液):等量或稍多,5-10min末梢采血消毒:75%酒精第一滴血因混有组织液,擦掉不用静脉采血消毒:30g/L碘酒,75%酒精有抗凝剂或其他添加剂的混匀四、血细胞计数WBC计数嗜酸粒计数RBC计数PLT计数稀释液2%冰乙酸丙酮-伊红Hayem液或枸橼酸钠甲醛盐水或生理盐水1%草酸铵稀释液作用稀释及破坏成熟RBC,固定WBC稀释,破坏RBC、其他WBC,使E着色稀释稀释,破坏RBC稀释液量0.38ml0.38ml2ml0.38ml血量20μl20μl10μl20μl稀释倍数202020020计数区域四角大方格上下两池四角及中央五个大方格中央大方格的五个中方格中央大方格的五个中方格沉淀时间2-3min3-5min2-3min10-15min公式N/4×10x20x106/LN×20x106/LN×5x10x200x106/LN×5x10x20x106/L参考值成人:(4-10)×109/L新生儿:(15-20)x109/L儿童:(15-20)x109/L(0.05-0.5)×109/L成年男:(4.0-5.5)×109/L成年女:(3.5-5.0)×109/L新生儿:(6.0-7.0)×109/L(100-300)×109/L校正存在有核红时:100/(100+有核红)xN白细胞分类计数血涂片,瑞士染色体尾交界处,“弓”形检查比值中杆中叶嗜酸嗜碱淋巴单核比例%1-550-700.5-50-120-403-8核左移:杆状核增多,出现幼稚中性粒核右移:5叶以上中性粒>3%MCV、MCH、MCHC测定项目:RBC计数、Hb测定、Hct测定Hb测定:血红蛋白仪法试剂预热配制参考值文齐液(HiCN转换液)水或文齐液预热30min20μlEDTA-K2血+5ml文齐液(混匀静置5min)成年男:120-160g/L成年女:110-150g/L新生儿:170-200g/LHct测定:温氏法试剂器材读数参考值EDTA-K2血水平离心机(2264g以上,离心30min),温氏管RBC柱层毫米数x0.01成年男:0.42-0.49成年女:0.37-0,48新生儿:0.47-0.67血沉魏氏测定方法试剂器材时间读数参考值109mmol/L枸橼酸钠抗凝血魏氏血沉管,血沉架1hRBC下降暴露的血浆长度(mm)成年男:<15mm/h成年女:<20mm/h七、尿液常规检测1、外观:颜色(淡黄、深黄、淡红、红色、乳白、浓茶、咖啡)透明度(透明、微浑、浑浊)尿蛋白定性磺基水杨酸法加热乙酸法原理磺酸根阴离子与尿蛋白氨基酸阳离子结合生成不溶性蛋白盐沉淀,沉淀程度与尿蛋白量成正比加热煮沸使蛋白质变性,加入乙酸加速蛋白质沉淀试剂200g/L磺基水杨酸溶液5%乙酸溶液方法1ml尿液+2d试剂混匀,黑色背景下1min内观察(有空白对照)加热(黑观察)→5%乙酸2-4d→加热(黑观察)结果肉眼可见微浑±云雾状+颗粒++絮状+++大量絮状或凝块++++同左方法学评论灵明度高,应用于干化学法测尿蛋白,但若尿中存在高浓度尿酸(盐)、草酸盐等干扰因素或混入生殖系统分泌物时易造成假阳性结果。对白蛋白敏感而球蛋白不敏感。操作略复杂,同样受生殖道分泌物的干扰成假阳性。对白蛋白和球蛋白都敏感尿糖检测对象尿中的葡萄糖原理高热、碱性环境中尿液中葡萄糖或其他还原性糖的醛基能将蓝色的硫酸铜还原为氧化亚铜,出现黄色至砖红色沉淀试剂班氏试剂(改良班氏定性试剂)方法尿离心取上清→2ml试剂煮沸1min观察试剂是否合格→加入0.2ml尿上清→混匀煮沸1-2min(尿液:班氏=1:10)结果蓝,色未变—蓝中绿无沉淀±液绿,黄绿沉淀少量+较多偏黄沉淀++液土黄,大量沉淀+++大量红沉淀++++方法学评价灵敏度较低,易受尿液中其他还原物质的影响而出现假阳性尿酮体环状法(Lange法)原理尿液中乙酰乙酸和丙酮与亚硝基铁氰化钠作用,与氨液接触后生成紫红色物质试剂亚硝基