DNA重组技术的基本工具.doc
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课题:DNA重组技术的课题:DNA重组技术的基本工具情景导入观“鱼”识水质复旦大学培育出转基因斑马鱼""转基因斑马鱼"(视频)情景导入...简述培育转基因斑马鱼的过程培育转基因斑马鱼的关键步骤有哪些?解决这些关键步骤需要哪些工具?工具?情景导入智慧共享基因工程培育转基因斑马鱼过程水母提取荧光蛋白基因普通斑马鱼与运载体DNA与运载体DNA拼接DNA拼接导入荧光斑马鱼情景导入智慧共享培育转基因斑马鱼的关键步骤...荧光蛋白基因从水母细胞内提取出来荧光蛋白基因与运载体DNA连接荧光蛋白基因导入基因导入受体细胞情景导入基因工程常用工具分子手术刀——限制性内切酶限制性内切酶分子手术刀智慧共享三大工具分子缝合针——DNA连接酶分子缝合针DNA连接酶DNA分子运输车——运载体运载体分子运输车互动课堂探究1探究1分子手术刀”一、“分子手术刀”——限限制酶231来源?来源?特点?特点?结果?结果?限制酶的来源资料分析:资料分析:在自然界中有一些生物的DNA物的DNA可能进入另DNA可能进入另一种生物的细胞中。一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例?的实例?这类原核生物原核生物之所以这类原核生物之所以来源:来源:长期进化而不绝灭,长期进化而不绝灭,主要在原核生物中有何保护机制?有何保护机制?限制酶的特点观察表格、观察表格、尝试归纳限制性内切酶的特点识别双链DNA分子中识别双链DNA分子中DNA特定核苷酸序列切割特定序列中的特定位点专一性拓展限制酶作用的化学键氢键磷酸二酯健√限制酶作用的结果结果及时反馈1、关于限制酶的说法中,正确的是关于限制酶的说法中,限制酶是一种酶,只识别GAATTCA、限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序列RⅠ切割的是切割的是GB、EcoRⅠ切割的是G-A之间的氢键限制酶一般不切割自身的DNADNA分C、限制酶一般不切割自身的DNA分只切割外源DNA子、只切割外源DNAD、限制酶只存在于原核生物中D及时反馈2、把两种来源不同的DNA进行重把两种来源不同的DNADNA进行重组,应该怎样处理?应该怎样处理?GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAG用同种限制酶切割(EcoR用同种限制酶切割(EcoRⅠ)GCAATTCGAATTCGTTAAGCTTAAGAATTCGGAATTCCTTAAGCTTAA缺口怎么办?缺口怎么办?探究2探究2分子缝合针”DNADNA连接酶二、“分子缝合针”—DNA连接酶阅读课本阅读课本第页、《创新设计》,小组讨论归纳答案创新设计》页DNA连接酶作用的化学键DNA连接酶作用的化学键是什么?是什么?DNA连接酶和DNA聚合酶DNA连接酶和DNA聚合酶连接酶和DNA有何异同点?有何异同点?DNA连接酶有哪些种类?DNA连接酶有哪些种类?连接酶有哪些种类其来源和特点分别是什么?其来源和特点分别是什么?汇报DNA连接酶作用的化学键DNA连接酶作用的化学键缝合的是磷酸二酯键汇报DNA连接酶和DNA聚合酶的异同点DNA连接酶和DNA聚合酶的异同点连接酶和DNA相同点..不同点DNA连接酶DNA连接酶.DNA聚合酶DNA聚合酶催化两个核苷酸之间形成磷酸二酯键在两个DNA片段DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存在的核酸片段上,核酸片段上,形成磷酸二酯形成磷酸二酯键DNA聚合酶催化DNA的合成汇报DNA连接酶种类DNA连接酶种类12E·coli连接酶T4连接酶T4连接酶只能连接黏性末端既可“既可“缝合”黏性末端又可“,又可“缝合”平末端及时反馈3、DNA连接酶催化的反应是()DNA连接酶催化的反应是(连接酶催化的反应是DNA复制时母链与子链之间形A、DNA复制时母链与子链之间形成氢键B、黏性末端碱基之间形成氢键两个DNADNA片断黏性末端之间的C、两个DNA片断黏性末端之间的缝隙的连接D、A、B、C都不正确D探究3探究3三、“分子运输车”—载分子运输车”载体阅读课本迅速找到种类。阅读课本第页、迅速找到种类。作用?作用?分子运输车种类?种类?特点?特点?汇报载体的种类其他λ噬菌体衍生物噬菌体衍生物动植物病毒化学本质?化学本质?质粒质粒是一种裸露的、结构简单、质粒是一种裸露的、结构简单、裸露的独立于细菌染色体之外的双链环状DNADNA分子双链环状DNA分子讨论载体的条件小组讨论,归纳答案