!"生物学通报#""$年第%&卷第!期哺乳动物细胞系!株"的应用李晓梅曾养志!云南农业大学动物科学与技术学院云南昆明’("#"!"摘要哺乳动物细胞系!株"已在细胞遗传学#分子遗传学和生物医学等方面得到越来越广泛的应用$其已被用于基因定位%检测理化因素的毒性和细胞因子活性#生产单克隆抗体#制备组织工程化人工器官和转基因动物等方面&更是研究发育生物学%肿瘤发生学%肿瘤治疗等不可或缺的材料$综述了哺乳动物细胞系!株"的建立方法及其在以上各方面的应用$关键词哺乳动物细胞系细胞株应用细胞系)*+,,,-.+/就是指从原代培养物经传代培养可用酶消化%机械刮除%反复贴壁等多种人工方法纯后得来的一群不均一的细胞#可以长期连续传代$根化细胞$据细胞系在体外能否持续传代#可将细胞系分为有限!"#诱变方法建系利用物理%化学%放射%病毒转细胞系)0-.-1+*+,,,-.+2与无限细胞系)-.0-.-1+*+,,,-.+2$染等方法诱导在体内或体外培养的正常细胞发生突通过选择或克隆化培养#从原代培养物或细胞系中获变#可建立各种永生细胞系或与自发性肿瘤细胞相似得的具有特殊遗传%生化性质或特异标记的细胞群称的肿瘤细胞系$为细胞株)*+,,3145-.2$这些特性#如具有一定标记染色!"$应用转基因方法建系转基因方法建立细胞系体%对某种病毒的敏感性或抗性以及具有特殊的抗原!株"#即利用转基因技术将外源基因插入正常细胞基性等#在以后的培养中必须持续存在$不能继续传代因组中#使细胞获得永生性#可建立各种永生化的细或传代数有限的细胞株#可称为有限细胞株)0-.-1+*+,,胞系!株"$3145-.2&可以连续传代的细胞株则称为连续细胞株#细胞系!株"的保藏!*6.1-.7673*+,,3145-."#如8+,5细胞’!($已建立的细胞系!株"由作者自行管理不便于使细胞系!株"的建立与使用可帮助人类从细胞水用交流#同时还存在细胞易污染和丢失的弊病$因此#平上揭开生%老%病%死的规律#探索优生#抗衰老#疾需要建立细胞库#使已经建立的细胞系!株"能得到妥病诊断与防治的手段或途径$尤其随着细胞生物学和善保藏#并方便各实验室交流使用$分子生物学的相互渗透#分子生物学实验技术与细胞国内外已建立的各种哺乳动物细胞系!株"约有培养技术的结合#使细胞系!株"在阐明基因的结构与几千种#保存于各国所建立的细胞库中$目前#国际上功能#基因在细胞生长和分化中的作用#以及细胞癌许多国家已建有细胞库#其中美国典型培养物保藏中变机制等方面发挥了重要的作用$而肿瘤细胞系的建心!9:+4-*5.;<=+>7,174+>6,,+*1-6.?9;>>"是现今世立与应用更为在体外研究肿瘤生物学特性#指导临床界上最大的细胞库$9;>>接纳来自世界各国已鉴定诊疗实践提供了有形的载体$现就细胞系!株"的建立的细胞#同时向世界各国研究者或实验室提供研究用方法及其应用作一综述#并对其应用前景进行展望$细胞及其各细胞系!株"的详细资料$!细胞系!株"的建立方法国内也建立了一定规模的典型培养物保藏中心$用不同组织来源的细胞建立细胞系!株"的难易这些保藏中心收集%保藏和分发我国的细胞系!株"资程度不同#而且虽然有些组织的细胞可以较容易地建料#研究和发展细胞系!株"质量控制方法#研究细胞立细胞系!株"#然而要建立永生化的或可以连续传代培养和保藏新技术#并可为研究和生产提供标准化的的细胞系!株"却比较困难$鉴于此#许多学者使用诱细胞系!株"$国家专利局委托武汉大学建立的中国典变%转基因等方法使正常细胞发生突变或插入外源基型培养物保藏中心!>@-.5>+.1+4;<=+>7,174+>6,,+*!因#从而成功建立了永生化的细胞系!株"$目前#建立1-6."#是国内保藏范围最广#专利培养物保藏数最多细胞系!株"的方法主要有%种#可根据需要选择使的保藏机构$中国科学院细胞库是中国科学院典型培用$养物保藏委员会的成员之一#由中国科学院上海细胞!"!常规原代培养方法建系常规建系采用人或动研究所主持$物的正常或自发肿瘤组织块#经移行法%机械分散法%$细胞系!株"的应用剪切分离法或消化分离法制备单细胞悬液原代培养近年来#随着分子生物学研究方法的进展#对细后传代获得$对于肿瘤组织#将新鲜瘤组织经接种于胞系!株"的研究%应用也逐步深入#各类细胞系!株"裸鼠成瘤后取材培养更易建系$原代培养成功的关键在细胞遗传学%分子遗传学%生物医学等方面的应用是无菌取材#并应避免不同细胞株之间的污染$目前研究均已广泛展开$!""#年第$%卷第&期生物学通报&&!"#利用已建成的细胞系!株"进行染色体分析#基化#肝功能衰竭患者’$周后逐渐恢复’最后接受了肝因定