免疫酶技术基本原理ELISA方法检测人血清中IgG.SandwichELISACompetitiveELISA双抗体夹心法：用于检测特异抗原。将已知抗体包被固相，加入待检标本，标本中含有相应抗原即与固相上的抗体结合，洗涤去除未结合成分，加入该抗原特异的酶标记抗体，加底物显色。目的：*掌握ELISA技术*检测血清中IgG含量材料：抗人IgG抗体（羊抗人IgG抗体）（一抗）已知IgG含量的参考蛋白（作标准系列）待检人血清辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体（二抗）包被液：PH9.60.05mol/L碳酸盐缓冲液洗涤液：PH7.40.01mol/LPBS底物溶液：OPD-H2O2终止液：2mol/LH2S04酶标反应板（一排/人）操作步骤孵育（37℃30min）洗涤3次加酶标记的抗人IgG抗体（即二抗）(100ul/孔)孵育（37℃30min）洗涤3次显色（加底物溶液，100ul/孔。室温避光15-30min）2MH2SO450ul/孔终止反应检测(490nm波长下检测)结果观察与分析：空白对照应无色；阳性孔呈棕黄色，标准系列各孔呈明显的颜色深浅梯度；绘制标准曲线。注意事项：做倍比稀释时，应从高浓度到低浓度；显色时一定避光；检测时应避免孔中有气泡。