生化与分子生物学实践学习PPT教案.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPTX 页数:41 大小:3MB 金币:10 举报 版权申诉
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第一节生物成分的分离与测定技术生命活动的主要承担者,一切性状的体现者是什么?1.原理:依据蛋白质的各种特性将不同种类的蛋白质分离,再依据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间的差异进行纯化。2.步骤:(1)样品处理(释放蛋白质):先将生物组织进行机械破碎,再根据细胞的特点选择不同的细胞破碎方法(常用的有——、——、——等?)破碎细胞,待细胞破碎后,各种蛋白质被释放出来。(2)粗分离(抽提蛋白质):根据蛋白质的不同性质,选择不同的溶剂进行抽提。例如,酸性蛋白质可用——抽提,水溶性蛋白质可用——抽提,脂溶性蛋白质可用——抽提。(3)纯化:a.原理:根据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间在分子大小、溶解度、所带电荷的多少、吸附性等方面存在的差异进行的。b.方法:有——、——、——等。(4)纯度鉴定3.电泳:(1)概念:(2)原理:利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、性状的不同使带电分子产生不同的泳动方向和速度,从而实现样品中各种分子的分离。(3)泳动的特点:带电颗粒直径越小,越接近于球形,所带净电荷越多,速度就越快,反之越慢。1.芳香油的来源:芳香植物的花、茎、叶、果实等。2.芳香油的特点:挥发性强;易溶于有机溶剂。3.提取方法:(1)蒸馏法(水蒸气蒸馏法)原理:利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来。步骤:a、水蒸气蒸馏;b、分离油层;c、除水过滤。使用范围:提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油。(2)萃取原理:使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发溶剂后就可以得到芳香油。课题目标:1、了解植物芳香油的来源,针对原料的不同特点,采用适宜的提取方法;2、结合橘皮精油的提取,正确选择提取方法,弄清植物芳香油提取的具体操作步骤。3、使用水蒸气蒸馏装置的注意事项有哪些?4、橘皮精油的主要成分是什么?为什么用压榨法提取?植物芳香油的提取方法二、实验材料及用品精油提取器三、实验步骤课外小知识如从玫瑰花中提取出的玫瑰油称为“液体黄金”,多用于制造高级香水等化妆品,是纯天然的护肤品。功效:具有极好的抗衰老和止痒作用,能够促进细胞再生、防止肌肤老化、平抚肌肤细纹,还具有使人放松、愉悦心情的功效。1、蒸馏时要提高产品质量,应采取的措施是A提高蒸馏温度,延长蒸馏时间B提高蒸馏温度,缩短蒸馏时间C降低蒸馏温度,缩短蒸馏时间D严格控制蒸馏温度,延长蒸馏时间2、用于提取植物芳香油的植物器官包括A花、茎、叶B树干、树皮C根、果实、种子D以上三项都是3、玫瑰精油被称为“液体黄金”,提取玫瑰精油的方法有A只用水蒸气蒸馏法B可用蒸馏法和压榨法C可用蒸馏法和萃取法D可用压榨法和萃取法4、在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳液提纯过程中,先后使用NaCl和无水Na2SO4的作用分别是A分层、吸水B溶解、吸水C吸水、分层D分层、萃取谢谢!第二节分子生物学技术一、分子生物学进展二、PCR技术(聚合酶链式反应)PCR反应中的主要成份1.引物(两种寡核甘酸)2.反应物(4种脱氧核苷酸)3.DNA聚合酶(常用Taq聚合酶)4.模板DNA5.Mg2+(提供反应的离子条件)6.反应缓冲液(提供反应的溶液体系)PCR是一种由引物介导的选择性体外扩增DNA的方法。包括三个基本步骤:(1)变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链;(2)退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(40℃~60℃)下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3)延伸(Extension):在TaqDNA聚合酶合成DNA的最适温度下(72℃左右),以目的DNA为模板进行合成。由这三个基本步骤组成一轮循环,理论上每一轮循环将使目的DNA扩增一倍,这些经合成产生的DNA又可作为下一轮循环的模板,所以经30轮循环就可使DNA扩增出230个拷贝。PCR循环–第一步–变性(94℃)PCR循环-第二步–退火(40℃-60℃)PCR循环-第三步–链延伸(72℃左右)第1个PCR循环完成后–得到两个拷贝的靶序列30次循环后靶序列扩增的数量细胞的破碎的方法:物理法二、实验材料及用品1、蒸馏时要提高产品质量,应采取的措施是A提高蒸馏温度,延长蒸馏时间B提高蒸馏温度,缩短蒸馏时间C降低蒸馏温度,缩短蒸馏时间D严格控制蒸馏温度,延长蒸馏时间二、PCR技术(聚合酶链式反应)PCR是一种由引物介导的选择性体外扩增DNA的方法。包括三个基本步骤:(1)变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链;(2)退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(40℃~60℃)下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3)延伸(Extension):在TaqDNA聚合酶合成DNA的最适温度下(72℃左右),以目的D