酵母样真菌检验标准操作程序酵母样真菌检验标准操作程序1检验目的规范酵母样真菌鉴定的标准操作程序。2检验程序的原理和方法通过美华MA120微生物鉴定仪及其他鉴别实验对酵母样真菌进行鉴定。3性能特征酵母样真菌为侵犯表皮以外组织和器官的病原真菌和条件致病真菌，通过对分离的病原菌鉴定及抗真菌药物的敏感性试验等，协助临床诊断、治疗、流行病学调查研究和院内感染的检测。4样品类型痰、尿、脓、各种体液、尿道及阴道分泌物、咽拭、脑脊液、血等标本。5所需的仪器和试剂5.1仪器：美华MA120鉴定仪、比浊仪。5.2试剂：念珠菌显色平板、革兰染液、白念珠菌ATCC90028、生理盐水。5.3其他：洁净玻片、无菌试管。6环境和安全控制满足二级实验室的生物安全柜内进行操作试验。7程序性步骤7.1镜检及染色方法7.1.1直接镜检直接镜检阳性说明送检标本中有真菌存在，排除污染的可能性后结合临床症状可做出初步诊断。7.1.2革兰染色后镜检此法适用于大多数临床标本，将临床标本或培养物固定于洁净载玻片上，进行革兰染色，酵母样真菌被染成蓝紫色。7.2培养特征：在科玛嘉念珠菌显色平板上生长18～24小时可见菌落，菌落呈奶油色、光滑的菌落。7.3鉴定：从科玛嘉念珠菌显色平板上挑取可疑菌落，用比浊仪配置菌液浓度相当于1麦氏单位，用美华MA120微生物鉴定仪进行细菌鉴定。7.4药敏：参见《MA120微生物鉴定药敏仪标准操作程序》及CLSIM100-S26最新版本文件。8质量控制程序参见《微生物组室内质量控制管理程序》。9警示或危急值当无菌部位培养出该菌属时，需联系临床。10实验室临床解释10.1目前临床上分离出的酵母70%～80%为白色假丝酵母菌及热带假丝酵母菌，其他在念珠菌显色培养基不能鉴定的酵母，可用微生物鉴定仪鉴定到种。无菌部位采集的标本中分离的任何酵母都必须鉴定到种，均有诊断意义。同一部位反复分离出同一菌种也具有重要意义。10.2从非无菌部位（痰、咽拭、粪等）分离到的条件致病菌（如白色假丝酵母菌），如直接镜检阳性，须认定具致病性。光滑假丝酵母菌以前归类于球拟酵母菌属，只能见到小的孢子，无念珠菌属具有的假菌丝及菌丝。11参考文献[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL42：医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2014[2]CLSI.ReferenceMethodforBrothDilutionAntifungalSusceptibilityTestingofYeasts;FourthInformationalSupplement.CLSIdocumentM27-S4.Wayne,PA:ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute;2012.[3]周庭银临床微生物检验标准化操作.第三版.上海：上海科学技术出版社，2015.