蛋白质的生物合成翻译ProteinBiosynthesisTranslation.pptx
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会计学蛋白质的生物合成,即翻译,就是将核酸中由4种核苷酸序列编码的遗传信息,通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序。蛋白质合成体系ProteinBiosynthesisSystem20种氨基酸(AA)作为原料酶及众多蛋白因子,如IF、eIFATP、GTP、无机离子一、翻译模板mRNA及遗传密码原核生物的多顺反子mRNA上存在遗传密码遗传密码表从mRNA5端起始密码子AUG到3端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为开放阅读框架(openreadingframe,ORF)。关于密码子(1)关于密码子(2)至1960年,虽然RNA如何参与蛋白质合成的总轮廓已经清楚,却仍未了解遗传密码的细节。破译遗传密码的最直接而又令人信服的途径是测定一个基因的核苷酸顺序及与其对应的多肽的氨基酸顺序,然后进行比较。但那时只有测定氨基顺序的有效方法,而没有测定核苷酸顺序的成熟方法。1961年Nirenberg等在大肠杆菌提取液中,借助于添加合成的多聚尿嘧啶核苷酸而合成出只含1种氨基酸〈苯丙氨酸〉的多肽,这说明polyU中含有苯丙氨酸的密码,从而部分地破译了遗传密码。随后经过科学家们的多年努力,终于对遗传密码有了较全面地了解。1.连续性(commaless)基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入或缺失,可能导致框移突变(frameshiftmutation)。2.通用性(universal)3.简并性(degeneracy)意义4.摆动性(wobble)密码子、反密码子配对的摆动现象U二、核蛋白体是多肽链合成的装置核蛋白体作为蛋白质的合成场所具有以下几种作用:(3)A位点:(Aminoacyl-tRNAsite)又叫做氨基酰tRNA位或受位。它位于大亚基,是结合一个新进入的氨基酰tRNA的位置(见后节叙述)。(4)转肽酶活性部位:位于P位和A位的连接处。(5)结合各种蛋白质因子:起始因子(IF)、延长因子(EF)、终止因子、释放因子(RF)。原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式:mRNA携带的遗传信息被翻译成蛋白质一级结构,但是mRNA分子与氨基酸分子之间并无直接的对应关系。这就需要经过第三者“介绍”,而tRNA分子就充当这个角色。或者说tRNA是氨基酸的运载工具。每种氨基酸都有1-6种各自特异的tRNA来负责转运。氨基酸+tRNA第一步反应第二步反应tRNA与酶结合的模型1.氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。2.氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreadingactivity)。氨基酰-tRNA的表示方法真核生物:Met-tRNAiMet(甲硫氨酸)原核生物:fMet-tRNAfMet(甲酰甲硫氨酸)注意:蛋白质生物合成过程TheProcessofProteinBiosynthesis参与蛋白质生物合成的成份(可溶性蛋白质因子)翻译的起始(initiation)翻译的延长(elongation)翻译的终止(termination)一、肽链合成起始(一)原核生物翻译起始复合物形成原核、真核生物各种起始因子的生物功能IF-3原核生物中mRNA都具有核糖体结合位点,它是位于AUG上游8-13个核苷酸处的一个短片段(4-6个核苷酸)叫做SD序列。这段序列正好与核糖体30S小亚基中的16srRNA的3’端一部分序列互补,因此SD序列也叫做核糖体结合序列。SD序列(shine-Dalgarno序列):---原核生物10个核苷酸左右的位置;(如AGGA/GAGG)的一段序列;3.能和原核生物16srRNA相应的富含嘧啶序列互补;4.在IF3、IF1促进下和30S亚基结合。S-D序列IF-3IF-3IF-3(二)真核生物翻译起始复合物形成二、肽链合成延长延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongationfactor,EF)原核生物:EF-T(EF-Tu,EF-Ts)EF-G真核生物:EF-1、EF-2原核延长因子又称注册(registration)延长因子EF-T催化进位(原核生物)Tu(二)成肽(三)转位fMet进位真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似,但有不同的反应体系和延长因子。另外,真核细胞核蛋白体没有E位,转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。三、肽链合成的终止终止相关的蛋白因子称为释放因子(releasefactor,RF)原核肽链合成终止过程多聚核蛋白体(polysome)电镜下的多聚核蛋白体现象翻译后加工和靶向输送PosttranslationalProcessing&ProteinTransportation从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性,必需经过不同的翻译后复杂