人教版高中生物选修1生物技术实践专题1果酒和果醋的制作一、制作果酒果醋的微生物：菌种名称比较C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量1、若氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，其反应式：1、材料的选择与处理选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。①、取葡萄500g，去除枝梗和腐烂的叶子。②、用清水冲洗葡萄1－2次除去污物。讨论：你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会2、清洗（WHY？）专题2微生物的培养与应用㈠.微生物的类群1.细菌的形态细菌主要是以二分裂的方式进行增殖（如右图）几种菌落及其形态几种菌落及其形态4.病毒的结构病毒的结构吸附微生物需要的五大类营养要素物质是：①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。㈢.培养基划分标准液体培养基：分离导入了目的基因的受体细胞血清中含有：①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等）②多种金属离子；③激素；④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分㈣.无菌技术①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min。③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。④紫外线消毒。①灼烧灭菌②干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。③高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)倒平板操作㈡.纯化大肠杆菌一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；二是存留在划破处的单个细胞无法形成规则的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。2.稀释涂布平板的操作方法4.菌种的保存三.结果分析与评价营养类型本课题知识小结:课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、课题背景3、常见的分解尿素的微生物1、实例：PCR技术要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；方法：⑴抑制大多数微生物的生长⑵促进目的菌株的生长结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。15.0g②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，叫做选择培养基6、怎样证明此培养基具有选择性呢？1、显微镜直接计数：2.间接计数法（活菌计数法）⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。⑵常用方法：稀释涂布平板法。注意事项①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板中，经涂布，培养计算出菌落平均数。③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。计算公式：实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落，但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。实验设计[二]制备培养基◆应在火焰旁称取土壤10g。◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行问题：为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？㈣.取样涂布㈤.微生物的培养与观察微生物的培养与观察操作提示四.结果分析与评价1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。1.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。CO（NH2）2+H2OCO2+2NH3大肠杆菌呈深紫色,中心有或无金属光泽本课题知识小结:专题3一、基础知识③特点