卡氏肺孢子菌MSG-UCS基因microRNA表达载体的构建和鉴定的中期报告本研究旨在构建卡氏肺孢子菌MSG-UCS基因microRNA表达载体，并通过鉴定确定其表达效果和稳定性。首先，我们设计了针对MSG-UCS基因的3个microRNA靶向序列，并将其克隆到pGL3控制质粒中。通过荧光素酶活性测定，确定有效的靶向序列，并选取其中一个序列（序列A）进行进一步的实验。接着，我们将序列A克隆到pCMV-miR载体中，构建了目标载体pCMV-miR-MSG-UCS(A)。为了鉴定该载体的表达效果，我们将pCMV-miR-MSG-UCS(A)转染到HEK293T和卡氏肺孢子菌中，并进行实时荧光定量PCR和Westernblot检测。结果表明，在HEK293T和卡氏肺孢子菌中，pCMV-miR-MSG-UCS(A)均能够显著降低MSG-UCS基因的表达水平，且效果稳定可靠。结论：我们成功构建了卡氏肺孢子菌MSG-UCS基因microRNA表达载体，并确定了其在HEK293T和卡氏肺孢子菌中的表达效果和稳定性。下一步将对其在细胞和动物模型中的功能进行深入研究。