实验6饲料中总磷的测定饲料中总磷的测定（钼黄比色法）3.仪器和设备实验室用样品粉碎机或研钵分样筛：孔径0.42mm(40目)分析天平：感量0.0001g分光光度计，有10mm比色池，可在400nm下进行比色测定高温炉：可控温度在（550±20）℃坩埚：瓷质容量瓶：50，100，1000mL刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10mL凯氏烧瓶：250mL或500mL可调温电炉：1000W饲料中总磷的测定（钼黄比色法）标准方形池●上开口，Teflon（聚四氟乙烯，即特富龙。是一种树脂）盖子，不密封●两面透光●内部抛光，精细打磨●适用于所有标准池支架4.试剂及配置盐酸溶液：1＋1,V+V浓硝酸高氯酸磷标准溶液：将磷酸二氢钾在105℃干燥1小时，在干燥器中冷却后称0.2195g，溶解于蒸馏水中，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml（？），用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，即成50μg/ml的磷标准溶液4.试剂及配置⑤钒钼酸铵显色试剂：称取偏钒酸铵（分析纯）1.25g，加硝酸250ml，另取钼酸铵（分析纯）25g，加蒸馏水400ml加热溶解，冷却后，将此溶液倒入上溶液，加蒸馏水定容至1000ml，避光保存。如生成沉淀则不能继续使用钼酸铵：用作生产高纯度钼制品的基本原料健康危害：吸入、摄入或经皮肤吸收后对身体有害，对眼睛、皮肤、粘膜和上呼吸道有刺激作用环境危害：不燃，有毒，具刺激性5.试样的选取和制备取有代表性试样用四分法缩减至200g，粉碎至40目装入密封容器中，防止试样成分的变化或变质大家有疑问的，可以询问和交流6.测定步骤（1）试样的分解干法（不适用于含磷酸氢钙的饲料）：称取试样2—5g于坩埚中（准确至0.0002g），在电炉上低温炭化至无烟为止，再放入高温炉于（550±20）℃下灼烧3小时（或测灰分后继续进行），取出冷却，在坩埚中加入盐酸溶液（1+1，V+V）10ml和浓硝酸数滴，小心煮沸约10分钟，将此溶液转入100ml容量瓶中，并用热水洗涤坩埚及漏斗中滤纸，冷却至室温后，定容，摇匀，为试样分解液6.测定步骤（1）试样的分解湿法：称取试样0.5～5g于凯氏烧瓶中（准确至0.0002g）。加入硝酸（化学纯）30ml，小心加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入高氯酸（分析纯）10ml，继续加热煮沸至溶液无色，不得蒸干（危险!）。冷却后加蒸馏水50ml，并煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，为试样分解液6.测定步骤（1）试样的分解盐酸溶解法（适用于微量元素预混料）：称取试样0.2～1ｇ（精确至0.0002g）于100ml烧杯中，缓缓加入盐酸溶液（1+1，V+V）10ml使其全部溶解，冷却后转入100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液6.测定步骤（2）标准曲线的绘制准确移取磷标准溶液（50ug/ml）0，1.0，2.0，5.0，10.0，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色试剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以50ml溶液中磷含量（μg）为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线PS：吸光度测试方法：1.按动“功能键”，切换至透射比测试模式2.调整测试波长3.置入遮光体，合上样品室，并使其进入光路，按动“调0%T”键调T零，此时仪器显示“00.0”或“-00.0。完成调T零后，取出遮光体4.按动“功能键”，切换至吸光度测试模式5.置入参比样品，按动“调100%T”键，此时仪器显示“BL”延时数秒后便显示“-.000”或“.000”6.置入待测样品，读取测试数据饲料中总磷的测定（钼黄比色法）6.测定步骤（3）试样的测定准确移取试样分解液1—10ml（含磷50－750ug）容量瓶中，加入钒钼酸铵显色试剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测得试样分解液的吸光度。用标准曲线查得试样分解液的含磷量6.测定步骤（4）测定结果计算试样中总磷的质量分数按下式计算W(P)=a*10-6(V/V1)/m式中：m:试样质量，gV:试样分解液总体积，mlV1:比色测定时所移取试样分解液体积，mla:由标准曲线查得试样分解液含磷量，μg/50ml10-6:从μg转化为g的系数所得结果应精确到两位小数重复性:每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果含磷量在0.5％以下（含0.5％）以允许相对偏差3％含磷量在0.5％以下，允许相对偏差10％注意事项1.比色时，待测