生物学抗体免疫技术学习PPT教案.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPTX 页数:30 大小:3.2MB 金币:10 举报 版权申诉
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免疫学技术免疫学技术--抗原抗体反应免疫学技术酶联免疫法(enzymeimmunoassay)酶联免疫吸附(enzymelinkedimmunosorbentassay)双抗体夹心法1、将已知抗体吸附于载体上2、温育后清洗3、加入可能含特异性抗原的待检液4、温育后清洗5、加入酶标记特异性抗体6、温育后清洗7、加入酶作用底物8、测定颜色反应深浅竞争法1、将已知抗体吸附于载体上2、温育后清洗3、加入可能含特异性抗原的待检液和酶标记的已知抗原液4、温育后清洗5、加入酶作用底物6、测定颜色反应深浅生物素-亲和素系统(biotin-avidinsystem)基本概念生物素:是一种维生素H,经活化后,可与抗体、抗原、酶以多配一的方式共价结合,且不影响它们的活性亲和素:从卵蛋白中提取的一种碱性糖蛋白,可与酶偶合,以1配多的方式对生物素有很强的亲和力BAS用于检测的基本方法:BAB法或BRAB法BA法ABC法酶联免疫吸附(enzymelinkedimmunosorbentassay)均相酶免疫测定法无需“固定在载体上”;无需“温育后清洗”斑点免疫结合试验以微孔薄膜为载体,酶免疫反应阳性结果在膜上出现色斑点胶体金标记较酶标记更为简便猪肉和尿液盐酸克伦特罗的免疫胶体金法快速检测瘦肉精中毒事件“瘦肉精”学名为盐酸克伦特罗,医学上又称克喘素,常用于治疗哮喘。由于盐酸克伦特罗添加于饲料饲喂动物后可明显促进动物生长,提高瘦肉率,所以养殖户称其为“瘦肉精”,曾在国内外广泛用于动物饲养生猪食用瘦肉精后皮毛光亮,呼吸急促,个别会出现腿抽搐,站不稳,爬坡困难;宰后猪的肌肉特别鲜红,后臀肌肉饱满,肥肉非常薄瘦肉精介绍《食品卫生法》《食品添加剂卫生管理办法》(GB2760)《动物性食品中兽药残留最高限量》(农业部公告第235号,2002年12月24日)规定:禁用药物,动物性食品中不得检出:瘦肉精、沙丁胺醇、西马特罗等31种违法者的法律责任:民事赔偿、行政处罚、刑事处罚盐酸克伦特罗残留检测方法猪肉全程监控中瘦肉精检测方法的选择免疫胶体金快速检测板的外观图检测原理灵敏度肉样或组织样:1ppb(标准前处理)或5ppb(简单前处理)尿样:1ppb(标准前处理)特异性:与沙丁胺醇等苯乙胺类药物没有交叉反应;准确性:与瘦肉精ELISA试剂盒的检测结果符合率>90%有效期:半年(冷藏闭光保存)操作步骤感谢您的浏览免疫学技术竞争法1、将已知抗体吸附于载体上2、温育后清洗3、加入可能含特异性抗原的待检液和酶标记的已知抗原液4、温育后清洗5、加入酶作用底物6、测定颜色反应深浅酶联免疫吸附(enzymelinkedimmunosorbentassay)“瘦肉精”学名为盐酸克伦特罗,医学上又称克喘素,常用于治疗哮喘。由于盐酸克伦特罗添加于饲料饲喂动物后可明显促进动物生长,提高瘦肉率,所以养殖户称其为“瘦肉精”,曾在国内外广泛用于动物饲养生猪食用瘦肉精后皮毛光亮,呼吸急促,个别会出现腿抽搐,站不稳,爬坡困难;宰后猪的肌肉特别鲜红,后臀肌肉饱满,肥肉非常薄