血细胞分析仪检测是临床诊断工作中最常用的实验方法之一40年代后期美国库尔特先生(W.H.Coulter)发明了粒子计数技术(电阻抗法),50年代初期应用于血细胞计数血细胞分析仪检测原理细胞的三分群：各种细胞在溶血剂中，经溶血剂中表面活性剂对细胞膜表面的脂蛋白作用后而分群，由于RBC膜表面的脂蛋白含量最少而易被破坏溶解,白细胞的细胞浆漏出，仅留下核与颗粒并使细胞缩小，原来最大的单核细胞经溶血剂作用后，体积就落在了小的淋巴和大的中性粒细胞之间，这样就按照溶血剂作用后体积大小，将白细胞分成三群。淋巴细胞：35-90fl;中间细胞：90-160fl;粒细胞>160fl依照三群细胞在白细胞体积分布的直方图上所分布区域的面积，计算得出每群细胞的百分比，并依照白细胞计数总数，求得每群细胞的绝对值。注意:各厂家的溶血剂配方不完全相同,对白细胞膜的作用程度不同,而各厂家对仪器的各类WBC区分设置也不尽相同.RBC及相关参数的检测RBC检测→电阻抗原理脉冲信号高度的叠加→HCT单个脉冲信号高度的均值→MCVRBC:36—360fL区间分析RDW:仪器将不同大小的脉冲信号分别贮存在不同通道,计算出相应的体积和数目,再统计处理得到RDW,用RBC体积的CV或SD表示.RBC计数中WBC含量可忽略不计,但在白血病或WBC异常增高时则对RBC及其相关参数有明显影响.PLT检测:电阻抗原理PLT和RBC一起同时被检测PLT体积分布:2—28fL,不同仪器的PLT直方图范围不一.MPV:是PLT体积分布直方图的产物MPV与PLT成非线性负相关PCT参考范围是一不恒定参数PDW:是PLT体积分布直方图的产物PLCR:＞12fL的PLT比率浮动界标技术1.RBC/PLT:为便于识别，在RBC/PLT通道一般把体积大于30f1的细胞计为红细胞(RBC)，而把体积小于30f1的细胞计为血小板(PLT)。一般的血细胞分析仪，PLT和RBC的分界点是固定的(例如30f1处)，这种情况属于固定界标。但也有例外的情况，有些公司的血细胞分析仪，可以把PLT和RBC的分界点人为地设置在5-30f1的范围内，在实测样本时，仪器根据PLT和RBC的分布曲线，自动在所设定的范围内寻找最低点，以得到正确的PLT.RBC及相关参数的结果，这就是浮动界标.2.WBC:当直方图出来后，由软件程序自动判别并寻找直方图上三个区域的起止点（即第一个高峰起止和第二个高峰地点）作为界标线，并以此为依据进行判读，由于设计理念的不同，稀释液和溶血剂对细胞的作用不同于固定界标，因此，浮动界标的wbc直方图很少有能超过350fl的横坐标。直方图每次的结果是不一样的，因此界标线的位置也是不一样，这就形成界标线的移动，就是浮动界标Hb检测:与WBC一起被检测SLS-HGB检测血红蛋白：测定原理：亚铁血红素中的Fe2+离子被十二烷基磺酸钠氧化，形成SLS-HGB衍生物，在550nm波长进行比色测定。SLS-Hb法测定与ICSH的参考方法相比，具有非常高的相关性(r=0.999)。二.血细胞检测技术的发展（五分类）1。光散射法(Scatter):来自激光光源的单色光束在10°--70°对细胞进行扫描,提供细胞结构、形态的光散射信息。光散射特别具有对细胞颗粒的构型和颗粒质量的区别能力，从而将三种粒细胞区分。利用高低角度光散射可同时对PLT和RBC进行计数.高角(5-15°)测量RBC数,检测PLT内容物.低角(1-3°)检测RBC\PLT体积.2。电导法根据细胞壁能产生高频电流的性质采用高频电磁探针，测量细胞内部结构、核浆比、细胞内颗粒大小和密度。电导法可辨别体积相同而性质不同的两个细胞群（如；小淋巴和嗜碱）3。射频技术；在测量小孔的内外电极装有直流和高频两个发射器，因此在小孔周围产生直流和射频两种电流，直流电仅能测量细胞大小，而射频可透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少。利用阻抗+射频技术可将淋巴、单核、粒细胞区分。4.过氧化物酶染色技术过氧化氢酶含量:嗜酸粒细胞＞中性粒细胞＞单核细胞.淋巴和嗜碱粒细胞无由于酶反应阳性程度不同,通过激光束时的吸光度也就不同,加上光散射及特殊溶血剂的作用可进行五分类.5.核酸荧光染色技术利用聚次甲基荧光染色液对有核细胞的核酸(DNA/RNA)进行荧光染色。采用半导体激光流式细胞检测，获得WBC/DIFF散点图并得到新的检测参数IG和OTHER。通过对散点图的分析，可获得LYMPH、MONO、EOS、NEUT+BASO及NRBC和Ret的测定结果。最早的全自动网织红分析仪R-1000TM，用荧光染料碱性槐黄；最新采用的是聚次甲基染料，用来进行WBC四分类、网织红细胞测定、有核