微生物的分类医学知识.ppt
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教学重点微生物分类学是研究微生物分类理论和技术方法的科学。其目的是研究各类微生物的特征及其亲缘关系,为微生物资源的利用、控制和改造提供理论根据。其内容包括分类(classification)鉴定(identification)和命名(nomenclature)3部分。目前,已记载过的生物种数约为150余万种,其中微生物为10~20万种,而且还在急剧的扩大。分类是根据一定的原则对微生物分群归类,根据相似性或相关性水平排列成系统,并描述各个类群的特征。鉴定是指借助于现有的微生物分类系统,通过特征测定,确定某一微生物应归属类群的过程,通过鉴定可达到知类、辨名的目的。命名是根据国际命名法规,为一个未知名字的新培养物确定其学名的过程。生物种类极其繁多。据估计,目前人们已鉴定命名的约有200万种,其中微生物约有20万种。第一节微生物的分类单元与命名(一)种以上的分类单元种(species)微生物种是表型特征高度相似、亲缘关系极其接近与其他种有明显差异的一群菌株的总称。在具体分类时,常用一个被指定的能代表这个种群的模式菌株或典型菌株(typestrain)作为该种的模式种(typespecies)来定种,模式种往往是定为一个新属的第一个种或第一批种之一,也可以是在某一已知属内任意指定的种。(二)种以下的分类单元培养物(culture):一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长物。如微生物的斜面培养物、摇瓶培养物等。二、微生物分类单元的命名Bacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn1872如:cillusthuringiensissubsp.Galleria第二节微生物分类鉴定方法2.代谢产物如通过检查微生物能否产生有机酸、乙醇、碳氢化合物、气体及硫化氢等;能否分解色氨酸产生吲哚;能否分解糖,能否产生色素、抗生素等。(三)生态特征二、化学分析法(四)磷脂、醌、多胺分析磷脂磷脂的种类很多,其中有5种可作为鉴定的指标:磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甲基乙醇胺(PME)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)和一种含葡萄糖胺未知结构的磷脂。运用高度标准化的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析,对支原体、细菌、放线菌和真菌的鉴定。大量研究表明全细胞蛋白质分析和DNA-RNA杂交有高度相关性,故此法可用于种和种以下的分类鉴定。常用的电泳方法有单向电泳和双向电泳,并应用特定的计算机软件对电泳图谱进行分析。三、遗传特征分类法(二)核酸杂交法不同微生物DNA碱基排列顺序的异同直接反应它们之间亲缘关系,碱基排列顺序差异越小,它们之间的亲缘关系越近,反之亦然。由于碱基对的排列顺序不能由DNA(G+C)mol%值反映微生物的亲缘关系,所以,目前分类学主要采用较为间接的比较方法——核酸杂交(nucleicacidhybridization),来比较不同微生物DNA中碱基排列顺序的相似程度,以进行微生物的分类。1.DNA-DNA杂交原理:在高温条件下,DNA双链离解成单链(变性),降温(退火)后互补的单链又可以重新结合形成双链DNA(复性)。根据DNA的这个特性,将两个不同的细菌的单链变性DNA混合,如果:结合成完整的双链——杂交率为100%。同源程度很高,其碱基顺序完全相同;部分结合,杂交率小于100%。同源程度不高,则单链会形成不同微生物之间。不同微生物之间,DNA同源程度越高,其杂交率就越高。<20%不同菌属;20%~60%属内密切相关的种;>60%的同种;>70%同一亚种。2.DNA–rRNA杂交当两个菌株DNA的非配对碱基超过10%~20%时,DNA-DNA杂交往往不能形成双链,因而限制DNA–DNA杂交主要用于种水平上的分类。比较亲缘关系更远的菌株之间的关系,需要用rRNA与DNA杂交。rRNA是DNA转录的产物。rRNA-DNA杂交也可以显示不同的细菌的碱基顺序的相似程度,因为rRNA的碱基顺序与一股单链DNA的碱基顺序互补。DNA同源性很低的两菌株,DNA-DNA杂交率很低或不能杂交时,用DNA-rRNA杂交,仍可表现出较高的杂交率,故可以比较亲缘关系较远的菌株间的关系,进行属及属以上分类单元的分类。DNA-rRNA杂交与DNA–DNA杂交的原理和方法基本相同。3.核酸探针核酸探针(probe)是指能特异识别特异核苷酸序列的、带有标记的一段单链DNA或RNA分子。换句话说,它是能与被检测的特定核苷酸序列(靶序列)互补结合,而不与其他序列结合的带标记的単链核苷酸片段。根据特异性的不同,核酸探针在微生物鉴定与检测中的作用也不同,有的探针只用于某一菌型的检测,有的可用于某一种、属、科至更大类群范围的微生物的检测或鉴定。核酸探针分为基因组DNA探针、RNA基因(cDNA)探针、RN