第36卷第l期广州化学、，01．36NO．12011年3月GuangzhouChemistryMat．2Oll文章编号：1009-220X(2011)Ol一0026—06养殖废水中四环素HPLC分析方法的研究贺蕴普，贺德春h，王志良。，韩静磊4，徐彬(1．中国科学院广州化学研究所，广东广州510650：2．湖南农业大学资源环境学院，湖南长沙410128；3．江苏省环境科学研究院，江苏南京210036；4．环境保护部华南环境科学研究所，广东广州510655)摘要：为了评价养殖废水中四环素类抗生素残留的状况，建立了养猪场废水中四种常见四环素类抗生素(土霉素、四环素、金霉素、强力霉素)的高效液相色谱分析方法。水样中四环素类药物经HLB固相萃取小柱吸附，甲醇乙酸乙酯溶液洗脱后用高效液相色谱紫外检测器测定。在O．O5～10．00~g／mL范围内，四种抗生素的峰面积与质量浓度的线性关系良好(R2≥O．999)，对土霉素、四环素、金霉素、强力霉素的最低检测质量浓度分别为0．10、0．15、0．30、0．18∥L，当添加质量浓度为O．0l~,edmL和0．1~te,／mL时，四种四环素类抗生素的平均回收率分别为83．35％~93．32％和86．72％~92．46％，相对标准偏差小于8．27％。该方法分离效果好，萃取简单，速度快，可满足养殖场废水中残留四环素类抗生素的测定。6个养殖场水样测定结果表明，四种药物在养殖废水中均有检出。关键词：养殖废水；高效液相色谱；四环素；土霉素；金霉素；强力霉索中图分类号：X703文献标识码：A兽用抗生素在现代集约化养殖业的发展中发挥了重要的作用，被广泛用于畜禽养殖和水产养殖业，用于预防和治疗疾病，促进动物生长以及提高饲料利用效率。许多用于畜牧业的抗生素难以被动物肠胃吸收，约30％~90％以母体化合物的形态排出【I】，残留于粪便、尿液及养殖水体中，并进入土壤、地表水及地下水等环境受体中L2J，可能破坏土壤、水体等环境中微生态系统，导致细菌的耐药性，从而对人类健康带来直接或间接的危害。近年来，环境中抗生素的残留、迁移、潜在风险及其来源已成为国际上环境领域研究的热点之一J。我国畜禽养殖业发达，兽用抗生素类药物用量大，成为我国环境中抗生素的重要来源。魏瑞成等【8】在江苏省多个养殖场周围水体中均检测到多种抗生素药物残留；张慧敏等J在浙江北部地区农田土壤中检出四环素类抗生素残留。建立养殖废水中抗生素类药物的残留分析方法，是研究控制养殖废水中抗生素药物排放的基础。目前，水体中抗生素的理化分析方法多采用高效液相色谱法(HPLC)【loJ、高效液相色谱一质谱(LC-MS)和高效液相色谱一质谱一质谱(LC-MSWIS)，由于LC．MS、LC．MSkMS仪器昂贵，国内许多实验室尚未配置，因此高效液相色谱法依旧是实验室最常使用的残留分析方法。本研究选择在我国养殖业中普遍使用收稿日期：2010—11—29通讯作者：贺德春，讲师。基金项目：江苏省环境工程重点实验室开放基金资助项目(KF2o09o0x)。作者简介：贺蕴普(1964～)，男，研究员，硕士；主要从事分析化学方面的研究。第1期贺蕴普等：养殖废水中四环素HPLC分析方法的研究27的四种四环素类药物为研究对象，考察了固相萃取柱、流动相对提取效果的影响，并以现有的高效液相色谱法为研究基础，优化实验条件，建立了养殖废水中四种四环素类药物的多残留分析方法，并应用于养猪场废水中四种四环素类药物的测定，该方法操作简便、价格低廉，易于推广。l买验1．1仪器和试剂岛津20A高效液相色谱系统，带紫外检测器、自动进样器、柱温箱(日本岛津公司)；十二孔固相萃取装置(ASE．12，天津奥特赛恩斯仪器有限公司)；氮吹浓缩仪(MIN．20000，天津奥特赛恩斯仪器有限公司)：0．45I．tm纤维滤膜，超纯水发生器。土霉素(OTC，98％)、四环素(TC，98％)、金霉素(CTC，95％)、强力霉素(DOXY,98．5％)，德国DR；甲醇、乙腈为色谱纯，草酸、三氯乙酸均为优级纯。1．2标准溶液及溶液配制准确称取土霉素、四环素、金霉素、强力霉素各O．0102、0．0102、O．0105、0．0101g，用甲醇溶解转移至10mL棕色容量瓶，甲醇定容，制得1．00gm的标准储备液，标准储备液保存在4~C冰箱中。分别取上述储备液各2．50mL于25mL容量瓶中，甲醇稀释至刻度，得质量浓度为100~tg／mL的混合工作液。1．3液相色谱条件岛津Cl8色谱柱(150×4．6mm，5m)；紫外光检测器，波长260nlng柱温40~C；进样量20“L；流速0．8mL／min。流动相：A(0．01