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HYPERLINK"http://www.bmalt.com"http://www.bmalt.com供稿桂花树叶栖内生真菌种类与分布桂花树为木犀科木犀属植物,其树干端直,树冠圆整,四季常青,是我国人民喜爱的传统名贵香花,更是城市绿化、美化的重要树种.前人已对桂花树的形态发育、品种分类、繁殖技术、资源利用及病虫害防治等进行了系统研究,但有关桂花树叶栖内生真菌未见系统研究报道.植物叶栖内生真菌是栖息于健康叶器官内部组织的各种真菌,其群落结构、种群密度及演替等与树木的生长发育、抗旱、抗寒和抗病密切相关.为了解桂花叶栖内生真菌种类及分布状况,探索桂花苗叶部病害无公害控制方法,笔者于2008年4月至2010年3月对此进行了调查研究.1材料与方法1.1标样的采集在河南省信阳市选取不同生境条件下的桂花栽培样地5个(信阳师范学院西区、信阳师范学院科技楼、浉河公园、信阳林校、信阳师范学院东区,编号分别为SW、KJ、SH、LX、LS),在各样地分别选金桂和丹桂两个品种的桂花(树龄10~30年)各2株.在冬春两季,分别在树冠阳面与阴面的上中下三个部位随机采集健康叶片各30片.将叶片放入无菌纸袋编号后存4℃冰箱保存备用.1.2内生真菌的分离与鉴定叶内生真菌的分离,将分离纯化后的真菌用不同基质的平板培养基培养并诱导产观察记录菌落、菌丝、产孢结构及孢子形态结构特征.统计计算每种真菌分离率.2结果与分析2.1桂花叶内生真菌的种类及分布特征本研究共取桂花组织591块,经培养得到真菌的组织为576块,得真菌率为97.5%.说明内生真菌在桂花叶内普遍存在.对分离获得的真菌进行纯化培养及产孢诱导,得产孢真菌17种,非产孢真菌9种,非产孢真菌占内生真菌种类的34.6%.经鉴定,产孢真菌隶属于13属,这些真菌全为半知菌.产孢真菌在桂花叶器官内的分布状况桂花叶器官各组织内生真菌丰度,叶器官不同组织内真菌丰度有明显差别,叶尖内生真菌种类较多,叶基及叶柄真菌种类较少,说明桂花内生真菌的种群分布具有组织特异性.桂花叶器官组织类型的不同,其细胞类型、排列方式及生理状态明显不同,组织内真菌生长发育所需的营养、温湿度以及氧气等因子也有差异,从而在不同的微生境中栖居的真菌种类也不一样.2.2生境对桂花叶器官内生真菌丰度的影响不同样地桂花叶内生真菌丰度,不同地区的桂花内生真菌丰度有明显差异,LS样地种类最丰富有26种,SH样地最少,仅13种,相差一倍.LS样地东、南、北三面均有建筑,桂花树体周围有大型乔木,该地湿度较大.SH样地为城市绿地,四周开阔,光照充足.2.3不同的生态条件是造成桂花内生真菌丰度地区差别的主要原因本研究对河南省信阳市两个品种的桂花叶栖内生真菌进行初步调查,分析表明内生真菌在桂花叶内分布普遍,且生态环境对其有较大影响,阴面叶内生真菌种类较丰富.这些研究结果与前人有关其他树种的研究相似.据报道,在同一地区同一种植物上内生真菌类群基本相似,但是有的内生真菌在不同组织上的丰度和分布明显不同,本研究结果也说明了植物内生真菌分布的这一现象.Carroll(1977)研究了7种分布在法国和瑞士的针叶树上不同组织的内生真菌群落,发现叶柄和叶顶端一些内生真菌种类明显不同,因此提出了一些内生真菌种类具有一定的组织专一性的假说.本研究结果也发现桂花同一器官不同的组织内,其内生真菌种类不同,这与Carroll假说是一致的.调查可知,大茎点霉属、链格孢菌属、刺盘孢菌属、拟茎点霉属真菌种类是桂花树优势内生真菌.而这些真菌在其他植物内生真菌研究中也有发现,而且它们的分离率较高,分布较普遍.不同种类、不同生态类型植物的这些同属内生真菌是否为相同物种,其生理及遗传性状有何差异,演化关系如何,这些问题值得进一步探究.本研究仅对桂花叶栖内生真菌的种类及分布进行了初步调查与分析,叶栖真菌是一类重要的微生物资源,有重要的开发利用价值.有关利用桂花叶栖有益真菌控制病害发生的问题有待深入研究.